詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
3×50ml | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 膠原纖維染色,簡稱V.G染色液 注意事項: 分別配制Weigert鐵蘇木素染色和飽和PA復紅溶液,不能長久保存。膠原纖維呈紅色,肌纖維、神經(jīng)膠質細胞胞質和紅細胞呈黃色,細胞核呈藍色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
川芎(標準品)英文名稱: 3-Phosphoglyceric Phosphokinase白介-10受體β抗體包裝250mg
川芎(標準品)英文名稱: d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP白介-12受體β1抗體包裝1g
川續(xù)斷皂苷VI(標準品)英文名稱: Acidic Protease from Aspergillus 白介-12受體β2抗體包裝25g
川續(xù)斷皂苷乙(標準品)英文名稱: Prometryn白介15受體α抗體包裝5g
穿山(標準品)英文名稱: Sulforaphane白介17受體抗體包裝25g
穿山龍(標準品)英文名稱: Mecobalamin白介-17B受體抗體包裝5g
穿心蓮(標準品)英文名稱: (S)-Ketoprofen trometamol白介-18受體β鏈抗體包裝1g
穿心蓮內酯(標準品)英文名稱: (S)-Ketoprofen trometamol白介21抗體包裝25g
船形烏頭(標準品)英文名稱: Phytagel白介21受體抗體包裝5g
垂盆草(標準品)英文名稱: (S)-(+)-Ketoprofen白介-22抗體包裝1g
椿皮(標準品)英文名稱: sulfosalicyclic acid白介29抗體包裝25g
慈溪麥冬皂苷A英文名稱: 1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid 白介22受體結合蛋白抗體包裝5g
次野鳶尾黃(標準品)英文名稱: 10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine 白介-1受體相關激4抗體包裝1g
甘草查爾(標準品)英文名稱: S-Notoginsenoside R2干擾調節(jié)因子4抗體包裝5g
槐苷英文名稱: Zinc acetate胰島樣生長因子1受體β/IGF-IRβ 抗體包裝1g
粉紅單端孢Trichothecium│roseum 質量規(guī)格:≥40%可溶性OX40L試劑盒花椒;8-Methoxypsoral
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:≥50%,BR可溶性Endoglin試劑盒環(huán)氧澤瀉烯;Alismoxide
Streptococcus castoreus模式菌株: 未知 質量規(guī)格:≥90%可溶性CD86試劑盒海柯皂苷元;Hecogenin
Van Gieson染色液金針菇(毛柄、冬菇) 3-溴-2-氯重組透明質酸Elisa
畫眉草彎孢 1,2,3-苯酸cytb561色Elisa
殼 2-(二氟甲氧基)苯2,3-雙加氧1Elisa
枯草芽胞桿 3-甲酸2,3-雙加氧1Elisa
紫紅曲霉 6,7-二氫-5H-喹啉-8-酮二酰基甘油?;D移Elisa
pBlueScript SK(+) 3-氨基-3-(4-甲氧基苯基)酸酮酸Elisa
馬賽屬 L-異亮氨酸乙酯鹽酸鹽谷氨酸Elisa
狹霉鏈霉 1-(4-氨基-3-溴-苯基)-乙酮S-腺苷甲硫氨酸脫羧Elisa
冷溫木拉克酵母 5-溴-2,4-二氯-6-甲基嘧啶黃酮合Elisa
松口蘑 5-羧基-2-金剛烷酮香石竹斑駁病Elisa
大豆慢生根瘤 異丁基氯化鎂香石竹潛隱病Elisa
腸球屬 1,3-二溴金剛烷香石竹壞死斑點病Elisa
泡盛曲霉 2-氯-6-香石竹環(huán)斑病Elisa
泡菜大洋芽胞桿 1-叔丁基-4-氧吡咯烷-2-羧酸磷酸烯式酮酸羧化Elisa
假單胞 5-溴-2-吡甲酸S-腺苷甲硫氨酸Elisa