改良Palmgren神經(jīng)染色液公司正在出售的產(chǎn)品：Galectin /FITC 熒光標(biāo)記半乳糖凝集抗體IgG鹽羥 AR，98.5%
GAI3/FITC 熒光標(biāo)記抑制型G蛋白α3抗體IgG碳鉛 AR
Galectin-3/FITC 熒光標(biāo)記半乳糖凝集-3抗體IgG式碳鉛 AR,99.0%
GAP-43 /FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)生長相關(guān)蛋白-43（抗體）IgG式碳鉛 ACS
GAPDH /FI

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

野牡丹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nefopam HCl間質(zhì)衍化因子受體1抗體包裝100ml

野木瓜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 17-Methyltestosterone神經(jīng)分化因子2抗體包裝25ml

野漆樹苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bumetanide核孔復(fù)合體蛋白抗體包裝25g

葉黃; 二羥基-d-胡蘿卜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tranexamic acid神經(jīng)性因子ICP34.5（人單純皰疹病Ⅰ型）抗體包裝5g

葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tranexamic acid背板膠質(zhì)乙酰酯抗體包裝100g

葉下珠（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Proglumide神經(jīng)PAS結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝500g

夜香牛（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： GW501516(GSK-516; GW1516)神經(jīng)增殖和分化調(diào)控蛋白1抗體包裝10g

一點(diǎn)紅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： IbuprofenNOTCH調(diào)節(jié)錨蛋白抗體包裝250g

一葉秋堿 ，一葉萩堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Bisacodyl神經(jīng)囊泡膜蛋白1抗體包裝50g

一枝黃花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Chlorhexidine Acatate突觸生長相關(guān)蛋白抗體包裝250ml

伊貝母(新疆貝母)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CyclopenthiazideNDUFA9蛋白抗體包裝50ml

乙酰丁香酚英文名稱： L-Methyldopa間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體包裝1g

乙酰杠柳寡糖C英文名稱： L-Methyldopa磷化間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體包裝5g

乙酰哈巴苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Mefenamic acid核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

乙?；邹继J(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Potassium iodide心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體包裝25g

發(fā)酵乳桿菌Lactobacillus fermentum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子試劑盒柴胡皂苷D;Saikosaponin D

灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR膠原吡啶交聯(lián)試劑盒柴胡皂苷C;Saikosaponin C

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR降脂試劑盒柴胡皂苷A;Saikosaponin A
改良Palmgren神經(jīng)染色液綠僵 5-氟吡啶-3-甲血管生成2Elisa

芹側(cè)耳（杏鮑菇） 雙環(huán)[2.2.2]辛烷-2,5-二烯-2-羧酸乙酯血管生成受體酪氨酸激1Elisa

解脂亞羅酵母 5-硝基吡唑-3-羧酸乙酯血管性血友病因子Elisa

植物乳桿 3-(4-苯甲酰)酸血紅蛋白Elisa

松衫暗孔 3-酮庚酸甲酯血紅氧合1Elisa

側(cè)孢短芽孢桿 脒鹽酸鹽血肌酐Elisa

短芽孢桿 4-(4-溴苯基)吡啶血漿前激肽釋放Elisa

釀膿鏈球 6-苯基吡啶-2-羧酸血尿Elisa

茄鏈格孢 6-甲基-3-氨基-2-吡啶血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1Elisa

小煤炱屬 3-溴-5-鹽酸鹽血清淀粉樣蛋白AElisa

羊邊蟲（綿羊無漿體—永壽株） 3,5-二-4-甲酸血清鐵Elisa

下彎巴克斯霉 3--4-羥基血清鐵蛋白Elisa

黃綠木霉 2-氨基間苯二甲酸血清總補(bǔ)體Elisa

黃海芽孢桿 3-羥基丁縮二甲血栓A2Elisa

雙孢蘑菇（可訂購） 1-(2-)哌血栓B2Elisa