詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
3×50ml|3×100ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途: 彈力纖維、膠原纖維和肌纖維染色 注意事項: Verh?eff染色法是一種彈力纖維染色的經典方法,英文全稱為Verhoeff Van Gieson,簡稱VVG,又稱EVG染色液。Verh?eff染色液主要由蘇木素::碘液=5:2:2混合而成。彈力纖維呈黑色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
大波斯菊苷,芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準...英文名稱: Sulbactam Sodium核蛋白4抗體(Ran結合蛋白4)包裝100g
大車前苷(標準品)英文名稱: 18-beta-glycyrrheticacid免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體包裝25g
大豆苷,黃豆苷 (標準品)英文名稱: 18-beta-glycyrrheticacid胰島樣生長因子結合蛋白7抗體包裝100ml
大豆,黃豆苷元(標準品)英文名稱: Tryptone 胰島樣生長因子結合蛋白6抗體包裝500ml
大風子(標準品)英文名稱: β-NaphthoflavoneKB抑制蛋白激ε包裝500mg
大腹皮(標準品)英文名稱: Clorsulon整合β4抗體包裝5MG
大果木姜子(標準品)英文名稱: Clorsulon磷化白介-7受體a抗體包裝1g
大紅袍(標準品)英文名稱: Sodium L-ascorbyl-2-phosphate磷化胰島受體底物-1抗體包裝5g
大黃(掌葉大黃)(標準品)英文名稱: 3-Isobutyl-1-methylanxthine磷化胰島受體底物2抗體包裝1g
大黃(藥用大黃)(標準品)英文名稱: Procaine hydrochloride磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝250mg
大黃酚(標準品)英文名稱: Procaine hydrochloride磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝5g
大黃酚-8-O-葡萄糖苷(標準品)英文名稱: Vorinostat impurity磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝1g
大黃(標準品)英文名稱: Swertianolin磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝5g
大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)英文名稱: saponin磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝1g
大黃(標準品)英文名稱: Aloperine磷化整合連接激1抗體包裝250mg
ATCC12344=DSM20565=NCTC8198資源名稱: 釀膿鏈球菌 質量規(guī)格:≥98%可溶性CD404-磺酰基肼鹽鹽;4-Sulfon
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品可溶性CD38試劑盒亥茅酚苷;Sec-O-Glucosylh
粉紅擲孢酵母Sporobolomyces│roseus 質量規(guī)格:≥99.0%,BR可溶性CD30配體試劑盒;Progesterone
Verh eff彈力纖維染色液鏈霉 2-酸-5-氟乙脫氫Elisa
根瘤桿屬 2-羧基-5-氟苯基酸甲硫氨酸Elisa
米曲霉 2-氯-3-氟芐溴G蛋白Elisa
薩氏艾美耳球蟲 3-羥基-2-吡啶甲酸鈣離子轉運ATPA2Elisa
平菇 3-乙氧羰基-4-氟苯基酸磷脂A1Elisa
不解糖鞘氨單胞 3-甲氧羰基-4-氟苯酸磷脂A2Elisa
擴展青霉 (S)-四-2-甲酸端粒結合因子Elisa
斐濟球腔 (R)-(+)-四-2-羧酸果糖-1,6-二磷酸Elisa
鼠李糖乳桿 2-氨基-4-景天庚酮糖二磷酸Elisa
紅色紅曲 4-溴芐天門冬氨酸Elisa
阿穆爾斯克灣鹽地桿 3-基天冬酰Elisa
柴油食烷 2-氨基-3,5-二氯吡a-亞麻油酸Elisa
金孢霉屬 2-溴-4-氯苯磷酸己糖異構Elisa
淺紫灰直絲鏈霉 雷米普利S-腺苷蛋氨酸脫羧Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 2-氯-6-氟苯乙酮羰基化蛋白Elisa