以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
hPGDS-IN-1是一種hPGDS抑制劑,熒光偏振檢測(cè)或EIA法測(cè)得IC50值為12nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1234708-04-3 分子量:416.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
釀酒酵母角蛋白19抗體Human IK(Protein Red) ELISA Kit人抗雙載蛋白(AMPH)抗體免疫試劑盒
哈茨木霉1號(hào)染色體開放閱讀框147抗體Human FCER1A(High affinity immunoglobulin epsilon receptor subunit alpha) ELISA Kit人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)IgG免疫試劑盒
綠色木霉膽固21-羥化抗體Human BIN1(Myc box-dependent-interacting protein 1) ELISA Kit人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA(dsDNA)抗體(IgM)免疫試劑盒
球孢白僵菌畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端)Human FUT3(Galactoside 3(4)-L-fucosyltransferase) ELISA Kit人抗生長(zhǎng)激(GH)抗體免疫試劑盒
金灰青霉補(bǔ)體C1qL3鏈多肽抗體Human HSF4(Heat shock factor protein 4) ELISA Kit人抗腎小球基底膜(GBM)抗體免疫試劑盒
毛木耳腫瘤/抗原27抗體(高遷移率族蛋白)Human HEXB(Beta-hexosaminidase subunit beta) ELISA Kit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)免疫試劑盒
金龜子綠僵菌1號(hào)染色體開放閱讀框228抗體Human TNFRSF10B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B) ELISA Kit人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)免疫試劑盒
死亡谷芽孢桿菌碳酐3抗體Human PLA2G2A(Phospholipase A2, membrane associated) ELISA Kit人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)免疫試劑盒
傳染性法氏囊病病親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIA抗體Human IK(Protein Red) ELISA Kit人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)免疫試劑盒
慢生根瘤菌鈣網(wǎng)蛋白抗體Human FCER1A(High affinity immunoglobulin epsilon receptor subunit alpha) ELISA Kit人抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)自身抗體免疫試劑盒
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌腫瘤/抗原65Human BIN1(Myc box-dependent-interacting protein 1) ELISA Kit人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)免疫試劑盒
雞傷寒沙門氏菌2號(hào)染色體開放閱讀框25抗體Human FUT3(Galactoside 3(4)-L-fucosyltransferase) ELISA Kit人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)免疫試劑盒
嗜果刀孢伴侶蛋白9抗體Human HSF4(Heat shock factor protein 4) ELISA Kit人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)免疫試劑盒
聚多曲霉7號(hào)染色體開放閱讀框25抗體Human HEXB(Beta-hexosaminidase subunit beta) ELISA Kit人抗?fàn)盍霾?7型(HPV17)抗體(IgG)免疫試劑盒
豬鏈球菌COG1蛋白抗體Human TOP2A(DNA topoisomerase 2-alpha) ELISA Kit人抗人絨毛膜促性腺激抗體(AhCGAb)免疫試劑盒
蘑菇過敏C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體Human NEFA(Nesfatin-1) ELISA Kit人抗染色質(zhì)解旋DNA結(jié)合蛋白4(CHD4)抗體免疫試劑盒
毛霉Mucor│sp. 質(zhì)量規(guī)格:AR26S蛋白體非ATP調(diào)節(jié)亞基11試劑盒掌葉防已堿;巴馬汀
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:IND25羥基維生D3試劑盒異丹酚B
: =ATCC6538資源名稱: 金黃色葡萄球菌金黃亞種 質(zhì)量規(guī)格:IND25羥基維生D2試劑盒大豆皂苷Aa
hPGDS抑制劑(hPGDS-IN-1)通道蛋白0(AQP-0)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AQP-0 ELISA Kit早老穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌組件蛋白APH1抗體包裝1g
雙氫睪(DHT)檢測(cè)試劑盒英文名稱:DHT ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝25g
瘦(Leptin)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Leptin ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝5g
瘦(LEP)檢測(cè)試劑盒英文名稱:LEP ELISA KitASH1L蛋白抗體包裝1g
嗜性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ECP ELISA Kitα2C-AR腎上腺能受體抗體包裝100g
嗜性粒細(xì)胞過氧化物(EPO)檢測(cè)試劑盒英文名稱:EPO ELISA Kit中心體蛋白AZI1抗體包裝25g
嗜粒細(xì)胞趨化因子(ECF)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ECF ELISA Kitα蛋白激3抗體(心?。┌b5g
嗜粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 3(Eotaxin 3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Eotaxin 3 ELISA Kit表皮型脂氧合3抗體(魚鱗病相關(guān)蛋白)包裝1g
嗜粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)域28抗體包裝250mg
嗜粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit相關(guān)AF4樣蛋白抗體包裝5g
嗜環(huán)蛋白/親環(huán)A(CyPA)檢測(cè)試劑盒英文名稱:CyPA ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝250g
視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)檢測(cè)試劑盒英文名稱:RBP-4 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體包裝500g
視黃結(jié)合蛋白(RBP)檢測(cè)試劑盒英文名稱:RBP ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體包裝1G
生長(zhǎng)抑(SS)檢測(cè)試劑盒英文名稱:SS ELISA Kit錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體包裝250MG
生長(zhǎng)釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GHRP-Ghrelin ELISA Kit脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體包裝1g