詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Caspase 6抑制劑
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:200μl
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Z-VEID-FMK是一種高效可逆的caspase-6的小分子抑制劑??梢砸种朴蒀aspase 6激活導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。Z-VEID-FMK分子式為C31H45FN4O10,分子量為652.7。 Z-VEID-FMK采用進(jìn)口高品質(zhì)原料分裝配制,濃度為5mM。本產(chǎn)品適用于需要用到Z-VEID-FMK的各種實(shí)驗(yàn),請(qǐng)根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行配制和使用,具體請(qǐng)參考相關(guān)文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)指南。 儲(chǔ)存條件:-20℃保存。 有效期:一年。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
5-三基尿嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rifabutin CD83抗體包裝250mg
5-硝基糠二乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rifapentine17號(hào)染色體開放閱讀框59抗體包裝50MG
6-氧基-2-萘乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rifapentine17號(hào)染色體開放閱讀框39抗體包裝25g
6-硫鳥嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Riluzole鈣敏感受體1抗體包裝5g
6-疏基嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Riluzole鈣結(jié)合蛋白Calponin抗體包裝1g
7-基去乙酰氧基頭孢烷(7-ADCA)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deferasirox2號(hào)染色體開放閱讀框44抗體包裝25ml
808猩紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deferasirox2號(hào)染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
Acarbose(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Risperidone2號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg
Acyclovir(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Risperidone2號(hào)染色體開放閱讀框29抗體包裝25g
Adiphenine HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ritonavir3號(hào)染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
Allylestrenol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ritonavir1號(hào)染色體開放閱讀框74抗體包裝1g
alpha-亞麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosiglitazone base補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白10抗體包裝5g
Altrenogest(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosiglitazone base1號(hào)染色體開放閱讀框93抗體包裝100g
Amisulpride(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosiglitazone Maleate 1號(hào)染色體開放閱讀框94抗體包裝25g
Anastrozole(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rosiglitazone Maleate 1號(hào)染色體開放閱讀框96抗體包裝500g
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品血小板活化因子試劑盒羊藿苷;Icariin
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,培養(yǎng)級(jí)血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1試劑盒遠(yuǎn)志;Polygalacic acid
不動(dòng)桿菌Acinetobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血纖肽/纖維蛋白肽B試劑盒隱丹參;Cryptotanshinon
Caspase 6抑制劑釀酒酵母 2-氯-4-甲氧基嘧啶巨噬激蛋白Elisa
米根霉 2-氯-5-甲基嘧啶加氧血紅-1Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 4,4-二氟庚二酸二乙酯21羥化Elisa
美澳型核果褐腐病 鹽酸瓦地那非三水合物21羥化Elisa
亞拉巴馬全緣孔 3,3-二甲基哌-2-酮肺表面活性蛋白Elisa
腐皮殼 3,5-二Elisa
食腺嘌呤芽生葡萄孢酵母 1-萘肼鹽酸鹽循環(huán)腫瘤Elisa
根瘤 3-氟-4-嗎啉基苯基異酸酯四環(huán)類Elisa
細(xì)鏈格孢 N-甲基-2-戊骨膜蛋白Elisa
黃赭色鏈霉 2-萘鹽酸鹽磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD-3Elisa
大腸埃希氏 酸磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD-4Elisa
嘴突凸臍蠕孢 2-溴-3-氯-5-硝基吡啶脫氧血紅蛋白Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生?;?/span> 乙酸鉍(III) (metals basis)氧合血紅蛋白Elisa
黃綠木霉 6-溴-1,2,3,4-四氫喹啉二型高密度脂蛋白Elisa
不產(chǎn)色鏈霉 N-苯基氨基乙酸乙基三型高密度脂蛋白Elisa