商品介紹:
Tofacitinib(CP-690550)是高效JAK3抑制劑,IC50為1nM,比對(duì)JAK2和JAK1的抑制性高20倍和100倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1092578-47-6 分子量:312.37 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK3抑制劑((3S,4S)-Tofacitinib)
英文名稱:(3S,4S)-Tofacitinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
艾登短芽孢桿菌半乳糖神經(jīng)酰抗體Human XPA ELISA Kit雞白介8(IL-8)免疫試劑盒
節(jié)桿菌磷化葡萄糖合成1抗體Human YEATS2 ELISA Kit雞白介6受體(IL-6R)免疫試劑盒
雷州灣芽孢桿菌半乳糖凝集3抗體Human XPNPEP1 ELISA Kit雞白介6(IL-6)免疫試劑盒
亮白曲霉生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白7抗體Human YOD1 ELISA Kit雞白介4(IL-4)免疫試劑盒
鞘單胞菌屬糖基轉(zhuǎn)移1結(jié)構(gòu)域1抗體Human YES1 ELISA Kit雞白介3(IL-3)免疫試劑盒
變異居白蟻菌G蛋白偶聯(lián)受體LGR7蛋白抗體Human XRCC5/Ku80(X-ray repair cross-complementing protein 5) ELISA Kit雞白介2(IL-2)免疫試劑盒
干酪乳桿菌G蛋白偶聯(lián)受體MRGX2蛋白抗體Human XRCC4 ELISA Kit雞白介1β(IL-1β)免疫試劑盒
少根根霉東京變種G蛋白偶聯(lián)受體RDC1蛋白抗體Human XRCC2 ELISA Kit雞白介18(IL-18)免疫試劑盒
類阿達(dá)青霉G蛋白偶聯(lián)受體TAS1R1蛋白抗體Human PDE1C(Calcium/calmodulin-dependent 3′,5′-cyclic nucleotide phosphodiesterase 1C) ELISA Kit雞白介17(IL-17)免疫試劑盒
膠孢G蛋白偶聯(lián)受體TGR7蛋白抗體Human XIAP(X-linked inhibitor of apoptosis ) ELISA Kit雞白介15(IL-15)免疫試劑盒
田菁根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR157蛋白抗體Human XRN1 ELISA Kit雞白介12(IL-12/70)免疫試劑盒
橙黃色擲孢酵母G蛋白偶聯(lián)受體GPR176蛋白抗體Human XRN2 ELISA Kit雞白介10(IL-10)免疫試劑盒
嗜糖黃桿菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR10蛋白抗體Human MTF1(Metal regulatory transcription factor 1) ELISA Kit雞白介1(IL-1)免疫試劑盒
皺褶假絲酵母G蛋白偶聯(lián)受體C5L2蛋白抗體Human XIRP2 ELISA Kit雞γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
托魯斯山鏈霉菌G蛋白偶聯(lián)受體EX33蛋白抗體Human XYLT1 ELISA Kit雞β內(nèi)酰(β-lactamase)免疫試劑盒
鏈卵菌屬G蛋白偶聯(lián)受體GPR102蛋白抗體Human YME1L1 ELISA Kit雞β干擾(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒
乳乳球菌乳亞種Lactococcus│lactis subsp. lactis 質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 10010-去乙酰紫杉;7-表-去乙?;仙?/span>
黃海芽孢桿菌Bacillus│marisflavi 質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 150多烯紫杉
球形賴芽孢桿菌Lysinibacillus│sphaericus 質(zhì)量規(guī)格:0.97三尖杉寧堿
JAK3抑制劑((3S,4S)-Tofacitinib)鹽替羅非班(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(?)-Salicin轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體包裝1g
鹽替扎尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(?)-Salicin磷化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體包裝5g
鹽頭孢吡肟 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magnolol真核肽鏈釋放因子1抗體包裝10MG
鹽頭孢噻呋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magnolol真核肽鏈釋放因子3a抗體包裝1g
鹽頭孢他美酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Esomeprazole magnesium trihydrate表皮生長(zhǎng)因子受體底物15抗體包裝5g
鹽土霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rutin內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN1抗體包裝10MG
鹽托烷司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rutin內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體包裝100g
鹽妥拉唑林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Neosperidin dihydrochalcone內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白ERGI3抗體包裝25g
鹽妥洛特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Neosperidin dihydrochalcone內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體包裝5g
鹽萬(wàn)古霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxymatrine內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp19抗體包裝25g
鹽維拉帕米(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxymatrine內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體包裝5g
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Andrographolide結(jié)核分枝桿菌分泌性蛋白ESAT6抗體包裝100g
鹽戊乙奎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Andrographolide真核翻譯起始因子1抗體包裝25g
鹽西替利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Apigenin上皮粘連調(diào)控蛋白ESRP2抗體包裝500g
鹽溴己新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ApigeninT和嗜性粒表達(dá)特應(yīng)性皮炎蛋白ETEA抗體包裝1g