產(chǎn)品屬性:
中文名稱:彈力纖維染色液(改良Gomori醛品紅法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:4×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 彈力纖維染色。還可以肥大細(xì)胞、對(duì)胰島素β細(xì)胞、腦垂體嗜堿性細(xì)胞染色。 注意事項(xiàng): 彈力纖維、肥大細(xì)胞、黏液呈紫色背景為不同程度的黃色。 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
丹皮酚原苷;牡丹酚原甙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Wilforlide A免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體包裝25g
丹葉大黃英文名稱: Forsythoside E胰島樣生長(zhǎng)因子不穩(wěn)定亞基ALS抗體包裝5g
丹葉大黃-3'-O-葡萄糖苷英文名稱: Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine豬胰島單克抗體包裝1g
丹芝B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea ExtractKB抑制蛋白激α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體包裝5g
單白前苷B英文名稱: Deoxycholic acid抗重組人胰島抗體包裝5g
膽固(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcein-AM 磷化肌聚磷鹽磷樣蛋白1抗體包裝25g
膽紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nicotinamide胰島受體抗體包裝5g
膽木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: cucurbitacins胰島受體α抗體包裝1g
膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-Hydroxytryptophan(5-HTP)胰島受體β抗體包裝5g
淡豆豉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-HydroxytryptophanKB抑制蛋白激α/β抗體包裝10mg
蛋黃磷脂酰英文名稱: Imazapyr acid白介12抗體包裝250mg
當(dāng)歸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imazapyr acid干擾誘導(dǎo)35蛋白抗體包裝100ml
當(dāng)歸尾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithocholic Acid完整膜蛋白E25A抗體包裝1g
當(dāng)歸?;昝仔?/span>H(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium Oxonate小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體包裝5g
當(dāng)歸酰基戈米辛O英文名稱: Potassium Oxonate胰島降解抗體包裝1g
多刺鏈霉菌Streptomyces│echinatus 質(zhì)量規(guī)格:≥90.0%,BR漢黃芩苷;Wogonoside
脫氮卓貝爾氏菌Zobellella│denitrificans 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,二合物顆粒體蛋白試劑盒黃芩;Baicalein
猴頭菌Hericium│erinaceus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品顆粒溶試劑盒黃豆黃苷; Glycitin
彈力纖維染色液(改良Gomori醛品紅法)*松乳菇 1-(4-基)-3-甲基-5-吡唑啉酮環(huán)磷酸鳥苷Elisa
烏飯樹擬莖點(diǎn)霉 2,5-二溴己二酸二乙酯NADH還原Elisa
豇豆慢生根瘤 4-溴鄰苯二甲酸酐色C還原Elisa
阪崎腸桿 亞磷酸二甲酯布魯東氏酪氨酸激Elisa
淡黃曲霉 5-氯吡啶-2-羧酸銅鋅超氧化物歧化Elisa
黑曲霉 DL-2-甲基丁酸甲酯L-天冬氨酸氧化Elisa
裂孔平伏 2-特戊酰氨基-6-皮考啉交替氧化Elisa
菊苣假單胞 2-特戊?;拎っ摎銭lisa
釀酒酵母 1-萘基異酸酯V型ATPElisa
煙酸芽孢桿 5-氟-2-異亞基氨基氧苯脫氧核糖核酸Elisa
枯草芽孢桿 溴二酸二甲酯透明質(zhì)酸Elisa
釀酒酵母 鈉固氮Elisa
華根霉 3,5-二甲基-1-氫-吡咯-2-羧酸叔丁酯-4-羧酸乙酯條紋花葉病Elisa
黃傘(可訂購(gòu)) 2-溴二苯并呋喃線條花葉病Elisa
畢赤酵母 3,4-二肼鹽酸鹽1.6二磷酸果糖酸Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)