產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DGAT1抑制劑(PF-04620110)
英文名稱:PF-04620110
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PF-04620110是甘油二酯酰基轉(zhuǎn)移酶-1(DGAT1)抑制劑,IC50為19nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1109276-89-2 純度:99.37% 分子式:C??H??N?O? 分子量:396.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
深凹杯傘基合成抗體Human TMEM35 ELISA Kit大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)免疫試劑盒
槐生多年臥孔菌高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體Human TMEFF2 ELISA Kit大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激(GC)免疫試劑盒
綠色木霉高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體Human TLK1 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮脂肪(EL)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌戊二酰脫氫抗體Human ITIH1(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1) ELISA Kit大鼠內(nèi)皮抑(ES)免疫試劑盒
皮殼青霉GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體Human TLK2 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS/NOS3)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體Human TM7SF2 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮轉(zhuǎn)換2(ECE2)免疫試劑盒
大腸桿菌廣泛控制基合成1樣蛋白1抗體Human TM7SF3 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮轉(zhuǎn)換1(ECE1)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌β1-6 N-乙酰基葡萄糖轉(zhuǎn)移2抗體Human TM9SF4 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮受體A(ETR-A)免疫試劑盒
耐寒短桿菌磷化G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體Human TINAGL1 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白2抗體Human TINAG ELISA Kit大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)免疫試劑盒
中間普氏菌間隙連接蛋白10抗體Human PZP(Pregnancy zone protein) ELISA Kit大鼠內(nèi)(ET)免疫試劑盒
平田頭菇3-1間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體Human TIP47 ELISA Kit大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)免疫試劑盒
鐮雄腐霉間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體Human TIMM13 ELISA Kit大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒
米根霉間隙連結(jié)蛋白31.9抗體Human TIPIN ELISA Kit大鼠膜相關(guān)磷脂A2(PLA2G2A)免疫試劑盒
白地霉甘油激2抗體Human TJAP1 ELISA Kit大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)免疫試劑盒
黃發(fā)鏈霉菌β-半乳糖苷1/β-Gal/彈性蛋白受體1抗體Human TIMM17A ELISA Kit大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)免疫試劑盒
: HBUM84148資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:用于GC-HS,≥99.8%(GC)基原薯蕷皂苷
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級基橙皮苷
匍枝根霉原變種Rhizopus│stolonifer var. stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:99%,離子對色譜級木蘭花堿
DGAT1抑制劑(PF-04620110)大葉紫珠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bromophenol red, sodium saltFAM153B蛋白抗體包裝5g
大棗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Butyl stearateFAM46C蛋白抗體包裝25ml
大皂角(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: C10E6舌癌耐藥相關(guān)蛋白1包裝1g
玳瑁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: C12E10FAM129B蛋白抗體包裝5g
丹參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: C12E9微管動力調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝1g
丹參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium chloride, anhydrousFAM50A蛋白抗體包裝5g
丹參鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium oxalate, monohydrateFAM113A蛋白抗體包裝5mg
丹參IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium oxide (Lime) powderFAM150A蛋白抗體包裝25ml
丹參IIA-磺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium oxide lumpFRMD8蛋白抗體包裝5ml
丹參I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium phosphate, monobasic, monohydrateFGFR1癌基因伴侶蛋白抗體包裝1g
丹酚A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium pyrophosphateFAM家族蛋白40A抗體包裝5g
丹酚B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Canada balsamFAM55D蛋白抗體包裝1g
丹酚B二酯英文名稱: Caprolactam組織激活過氧化活化增生受體γ蛋白抗體包裝25g
丹酚C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carboxypeptidase YFAM21C蛋白抗體包裝5g
丹酚D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Castor oilFAM13C1蛋白抗體包裝1g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)