公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:透明質(zhì)酸染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 區(qū)分結(jié)締組織蛋白多糖中是否硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸 注意事項(xiàng): 根據(jù)透明質(zhì)酸酶可以裂解透明質(zhì)酸和硫酸軟骨素的糖苷鍵這一特性,同時(shí)聯(lián)合使用阿利新藍(lán)染色液,使上述物質(zhì)不著色,而未處理的呈亮藍(lán)色,該法需要做陽(yáng)性對(duì)照。 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
靛玉紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Berberine hydrogen sulphate磷化胰島受體β抗體包裝5g
丁公藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Xanthiazone 整合alpha E2 抗體包裝1g
基酞(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Xanthiside 整合αV抗體包裝250mg
丁香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Raddeanoside R8免疫球蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
丁香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 無(wú)胰島樣生長(zhǎng)因子1受體抗體包裝5g
丁香樹(shù)脂雙葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prosapogenin CP6胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白樣1抗體包裝10MG
丁香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Crovatin免疫球蛋白D重鏈保守區(qū)抗體包裝25g
丁香葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CroverinIV型己糖激抗體包裝25g
丁東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: levatin免疫球蛋白lambda樣肽1抗體包裝5g
東風(fēng)桔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: XanthatinNF-kappa-B抑制子beta抗體包裝1g
東莨菪苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pungiolide ANF-kappa-B抑制子epsilon抗體包裝100g
東莨菪內(nèi)酯;7-羥基-6-氧基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Jatropholone B絲/蘇蛋白激ICK抗體包裝25g
冬蟲(chóng)夏草英文名稱: 3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol 纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白172抗體包裝5g
冬蟲(chóng)夏草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 11-hydroxy-sugiol 絲/蘇蛋白激ICK抗體包裝25g
冬凌草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-(+)-Lactic acid肽酰tRNA解ICT1抗體包裝5g
阿拉伯海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│arabiensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品柯薩奇病A16試劑盒蒿;Artemether
耐乳桿菌Lactobacillus│acetotolerans 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31柯薩奇病A16試劑盒槲皮;Quercetin
磚紅鐮孢Fusarium│lateritium 質(zhì)量規(guī)格:粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s柯薩奇病A16試劑盒胡黃連苷Ⅱ;Picroside Ⅱ
透明質(zhì)酸染色液松口蘑 3,4,5-三氯苯酸中性蛋白Elisa
巴斯德畢赤酵母 3-甲基噻吩抗壞血酸氧化Elisa
滑假絲酵母 N-氨基-3-氮雜雙環(huán)[3.3.0]辛烷鹽酸鹽D-半乳糖酸酯還原Elisa
糙皮側(cè)耳 3,4-二氯肌加氧Elisa
孢籃狀 4-氨基-3-溴三氟甲苯麥角蛋白Elisa
美澳型核果褐腐病 4-羥基-2-甲酸姜辣Elisa
海境芽孢桿 5-羥基-2-甲酸果聚糖Elisa
大腸埃希 磺脒Na-K-ATPElisa
鄰單胞屬* 枸櫞酸鉍葡萄糖Elisa
葡萄座腔 D-對(duì)羥基苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽木質(zhì)Elisa
大腸埃希 2-氯甲酯類黃酮葡萄糖苷轉(zhuǎn)移Elisa
動(dòng)物源細(xì)耐藥性檢測(cè)板-金黃色葡球 5,5-二苯基海因氯霉Elisa
矩圓黑盤(pán)孢 4-氯-3-溴甲苯ataxin-3抗體Elisa
卡爾斯伯酵母 2-甲氧基苯酸過(guò)氧化物Elisa
黃曲霉 4-甲苯酸果糖-1,6-二磷酸縮Elisa