以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JAK1抑制劑(Itacitinib) | Itacitinib | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Itacitinib(INCB039110)是一種選擇性的JAK1抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1334298-90-6 別名:INCB039110 純度:99.87% 分子量:553.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
印度芽孢桿菌軟骨蛋白聚糖抗體Human LRMP ELISA Kit豬磷激,γ1(肌肉)(PHKG1)免疫試劑盒
釀酒酵母5-基乙酰合1抗體Human LRDD ELISA Kit豬磷化乙酰羧化(pACCase)免疫試劑盒
斑玉蕈p53凋亡激蛋白1抗體Human LRPAP1 ELISA Kit豬磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)免疫試劑盒
木蹄層孔菌P53凋亡激蛋白2抗體Human LRR 1(Leucine-rich repeat protein 1) ELISA Kit豬磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種激活受體2B抗體Human LRRC1 ELISA Kit豬磷甘油酯激2(PGK2)免疫試劑盒
佩特曲霉AIMP2抗體Human LPIN2 ELISA Kit豬藍耳病(PRRSV)抗體(IgG)免疫試劑盒
膠孢乙酰膽堿抗體Human LPHN3 ELISA Kit豬賴酰氧化免疫試劑盒
美麗短芽孢桿菌5-基乙酰合1抗體Human LPPR2 ELISA Kit豬口蹄疫抗體免疫試劑盒
奇異球菌防御α1/3抗體Human LPP ELISA Kit豬口蹄疫抗體(IgM)免疫試劑盒
根瘤菌ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體Human LRCH1 ELISA Kit豬口蹄疫抗體(IgG)免疫試劑盒
紅曲紅曲植物延長蛋白(擬南芥)Human LPXN ELISA Kit豬可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒
短桿狀馬賽菌A-Raf抗體Human LRAT ELISA Kit豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)免疫試劑盒
傘枝犁頭霉磷化A-Raf抗體Human LPIN2 ELISA Kit豬可溶性間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒
摩洛哥芽孢桿菌紅腺苷脫3抗體Human LPP ELISA Kit豬可溶性P選擇(sP-Selectin)免疫試劑盒
囊孔附毛菌雄激結(jié)合蛋白抗體Human LMNB2 ELISA Kit豬抗中性粒彈性蛋白抗體(ANEA)免疫試劑盒
膠孢肝再生增強因子抗體Human LPPR2 ELISA Kit豬巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC補體片段3d試劑盒紫莖女貞苷D
海洋紅嗜熱鹽菌Rhodothermus│marinus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補體片段3c試劑盒紫莖女貞苷C
泡盛曲霉Aspergillus│awamori 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補體片段3b受體試劑盒紫莖女貞苷B
JAK1抑制劑(Itacitinib)組織蛋白D抗體Nodal同源物(NODAL)檢測試劑盒NODAL ELISA Kit
組織蛋白H抗體NADH脫氫1(ND1)檢測試劑盒ND1 ELISA Kit
磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體Misato同源物1(MSTO1)檢測試劑盒MSTO1 ELISA Kit
磷化半胱蛋白9抗體Mdm2p53結(jié)合蛋白同源物(MDM2)檢測試劑盒MDM2 ELISA Kit
磷化半胱蛋白9抗體M2-型激(PKM2)檢測試劑盒PKM2 ELISA Kit
磷化β 連環(huán)蛋白抗體L-型電壓依賴性鈣離子通道α1D亞(CACNα1D)檢測試劑盒CACNα1D ELISA Kit
磷化β 連環(huán)蛋白抗體L-型電壓依賴鈣離子通道α1S亞(CACNα1S)檢測試劑盒CACNα1S ELISA Kit
磷化β 連環(huán)蛋白抗體L-型電壓依賴鈣離子通道α1F亞(CACNα1F)檢測試劑盒CACNα1F ELISA Kit
磷化β 連環(huán)蛋白抗體L-型電壓依賴鈣離子通道α1C亞(CACNα1C)檢測試劑盒CACNα1C ELISA Kit