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詳細介紹
商品介紹：
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性甲臢化合物[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁)，內(nèi)鹽；MTS]快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。 MTS被細胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物，新陳代謝活躍的活細胞內(nèi)的脫氫酶類將MTS轉(zhuǎn)化成液態(tài)可溶的甲臢化合物，這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測量，而不需要另外作處理。由490nm測量的吸收值所表示的甲臢產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)物中活性細胞的數(shù)量成正比。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數(shù)量呈線性關(guān)系。 MTS溶液可以直接加入到細胞樣品中，不需要預(yù)配各種成分，MTS溶液很穩(wěn)定，對細胞沒有毒性，可以長時間孵育細胞。MTS法測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數(shù)目的靈敏度高，無放射性，檢測細胞增殖實驗的靈敏度比其它方法如MTT,XTT和WST-1高。 儲存條件：2-8℃避光保存。長期不用的分裝后于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。 有效期：一年。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
250T|500T|1000T | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Finasteride（標準品）英文名稱： Torasemide豬瘟病抗體包裝1g
Fludrocortisone acetate(標準品...英文名稱： Travoprost嗜鉻粒蛋白C抗體包裝5g
Flumethasone（標準品）英文名稱： Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α10/AChRα10抗體包裝5g
Fluocinolone Acetonide(標準品)英文名稱： Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α6/AChRα6抗體包裝5MG
Fluorometholone(標準品)英文名稱： Trilostane煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體包裝1g
Fluticasone Propionate（標準品）英文名稱： Trilostane煙堿型乙酰受體δ/AChRδ抗體包裝5g
Gefitinib(標準品)英文名稱： Triptorelin Acetate凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝1g
Gemcitabine HCl（標準品）英文名稱： Vancomycin HCl凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝5g
Gestodene(標準品)英文名稱： Vancomycin HClβ衣被蛋白抗體包裝100mg
Hexestrol(標準品)英文名稱： Vandetanib 半胱蛋白4/11抗體包裝1g
Hydrocortisone（標準品）英文名稱： Varenicline Tartrate1號染色體開放閱讀框187抗體包裝1g
Hydroxyprogesterone caproat...英文名稱： Varenicline Tartrate9號染色體開放閱讀框61抗體包裝5g
L-(-)-葡萄糖(標準品)英文名稱： Vinorelbine TartrateC末端結(jié)合蛋白2抗體包裝25g
L-半胱(標準品)英文名稱： Vinorelbine Tartrate21號染色體開放閱讀框13抗體包裝1g
L-茶（標準品）英文名稱： Voriconazole冠蛋白3抗體包裝250mg
藍灰干酪菌Tyomyces│caesius 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品血清淀粉樣蛋白A4試劑盒小檗紅堿硫酯;
舟狀單頂孢Monacrosporium│scaphoides 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,合物血清淀粉樣蛋白A3試劑盒小檗紅堿;Berberrubine
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品血清淀粉樣蛋白A試劑盒腺嘌呤;Adenine
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒赭曲霉 3-基-4-異氧基甲酯EB病Rta蛋白Elisa
紙葡萄穗霉 氟米松EB病Rta蛋白Elisa
釀酒酵母 2,3-二氟-4-氧基苯酸異檸檬酸脫氫2Elisa
德氏乳桿保加利亞亞種 5-氯吡-2-甲酰葡萄糖6磷酸異構(gòu)Elisa
疣青霉 2--3-羧酸吡肝結(jié)合蛋白Elisa
中國平臍蠕孢 2.3-二氟-4-乙氧基苯酸Sal樣蛋白4Elisa
釀酒酵母 2,5-二(2-噻吩基)噻吩并[3,2-b]噻吩CD5分子Elisa
美澳型核果褐腐病 2-甲基-5-硝基吡啶可溶性SCD14受體Elisa
大腸埃希 達比加群酯羧酸酯1Elisa
pCMV-HA(pCMV-HA-N) 3-氯-4-吡啶甲酸乙酯載脂蛋白L1Elisa
格氏乳球 2-硝基間苯二甲酸AβpE3Elisa
脫皮毛球馬勃* 3-氨基-4-噠羧酸硬脂酰去飽和1Elisa
金灰青霉 2-氯-5-溴-3-三氟甲基吡啶硬脂酰去飽和1Elisa
香菇 3-氟-4-氧代-1-甲酸叔丁酯Δ6去飽和Elisa
黑曲霉 5-氨基-3-氟苯核因子-κB亞基p65親和肽Elisa
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