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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
250T|500T|1000T | 1～3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒是應(yīng)用二甲氧唑黃2,3-bis[2-methoxy -4-nitro-5-sμlfophenyl]-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。 XTT在電子耦合試劑存在的情況下能夠被線粒體內(nèi)的一些與輔酶Ⅱ相關(guān)的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan，生成的Formazan量與活細胞數(shù)量成正比。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數(shù)量呈線性關(guān)系。 本XTT試劑為配制好的即用型試劑，直接加入到細胞樣品中，不需要預配各種成分，XTT試劑很穩(wěn)定，對細胞沒有毒性，可以長時間孵育細胞。XTT 法測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數(shù)目的靈敏度高，無放射性，檢測細胞增殖實驗的靈敏度比其它方法如MTT高。 儲存條件：2-8℃避光保存。長期存放-20℃避光保存。 注意： 1．XTT試劑短期存放于2-8℃，長期存放請分裝后-20℃避光保存。 2．避免反復凍融。 3．凍存后溶解時注意重新混勻。 有效期：一年。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
L-腎上腺(標準品)英文名稱： Sumatriptan succinate 順鉑耐藥相關(guān)蛋白9抗體包裝5g
L-絲(標準品)英文名稱： Streptomycin Sulphate22號染色體開放閱讀框40抗體包裝1g
L-天門冬(標準品)英文名稱： Streptomycin Sulphate嗜粒趨化蛋白3抗體包裝1g
L-巖藻糖(標準品)英文名稱： Dihydrostreptomycin Sulphate21號染色體開放閱讀框33抗體包裝250mg
L-異亮（標準品）英文名稱： Diclofenac sodium角蛋白15抗體包裝5ml
Lenalidomide（標準品）英文名稱： Diclofenac sodium角蛋白14抗體包裝1g
Letrozole（標準品）英文名稱： Gabapentin神經(jīng)NB3特定蛋白抗體包裝1g
Levonorgestrel（標準品）英文名稱： Gabapentin促胃泌受體抗體包裝5g
Loperamide HCl(標準品)英文名稱： Domperidone單克抗體包裝1g
Losartan Potassium英文名稱： Domperidone2號染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
m-酚-4-磺銨(聚酚磺雜質(zhì))（標準品）英文名稱： Niclosamide間粘附分子3抗體包裝1g
m-酚-4，6-二磺銨 （聚酚磺雜質(zhì)）（標準品...英文名稱： Niclosamide染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體包裝1g
m-酚-6-磺銨(聚酚磺雜質(zhì))（標準品）英文名稱： Ciprofloxacin降鈣抗體包裝25g
MB1120-S英文名稱： Ciprofloxacin降鈣基因相關(guān)肽1型受體抗體包裝5g
Medroxyprogesterone acetate...英文名稱： FamciclovirCD19抗體包裝500mg
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%血漿激肽釋放試劑盒L-纈;L-Valine
: JCM13471資源名稱: DSMZ17855, Type strain 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品血漿α顆粒膜蛋白試劑盒香草;4-hydroxy-3-meth
彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR血紅氧合2試劑盒雪松;Cedrol
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒釀酒酵母 1-N-BOC-4-乙?；蚣る脑?Elisa
糙皮側(cè)耳 2,4,6-三氟異硫酸苯酯彈性蛋白Elisa
佐久氏沙雷氏 3-苯氧基苯甲酰肼DNA甲基化轉(zhuǎn)移3AElisa
總狀毛霉 1-丁基-3-氟苯DNA甲基化轉(zhuǎn)移3BElisa
釀酒酵母 反式-2-三氟甲基肉桂酸副流感病Elisa
稻黑孢霉 (二甲基氨基)二甲基(2,3,4,5,6-五氟苯氧基)亞六氟磷酸鹽抗磷脂酰絲氨酸抗體Elisa
缺陷短波單胞 3-氯吡啶-2-甲核酸外切1Elisa
無 5-氯-2-苯并噻唑啉酮核酸外切1Elisa
靈芝(紅芝，赤芝)（可訂購） 2-羥基-3-基吡啶耳石蛋白1Elisa
孟氏假單胞 2-氟-4-橋粒芯蛋白3IgGElisa
孢吸水鏈霉 5-溴-2-氯-4-(苯氧基)-嘧啶蛋白精氨酸脫亞氨4Elisa
白井盤多毛孢 3-基-5-硝基三氟甲苯瓜氨酸化抗凝血Elisa
凝結(jié)芽胞桿 Fmoc-D-3-基苯氨酸c-fosElisa
金產(chǎn)色鏈霉 Fmoc-L-3-基苯氨酸色CElisa
蟲草屬 Fmoc-D-2-氯苯氨酸可溶性內(nèi)皮生長因子Elisa
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