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          上海谷研實業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>>Caspase 2熒光法檢測試劑盒(AFC)

          Caspase 2熒光法檢測試劑盒(AFC)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-21 11:14:14瀏覽次數(shù):249

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T|50T|100T
          貨號 GOY-01X9573 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Caspase-2 Fluorescence Metric Assay
          Caspase 2熒光法檢測試劑盒(AFC)公司*的產(chǎn)品:Caspase-6 (NT) 半胱蛋白酶蛋白-6抗體(N端)滅草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品
          Caspase-6 (NT) 半胱蛋白酶蛋白-6抗體(N端)滅草隆
          Caspase-7 半胱蛋白酶蛋白-7抗體N-酮 97%
          Caspase-8 半胱氨蛋白酶8抗體一氧化異戊二烯 95%
          Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體異

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅用于科研

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:Caspase 2熒光法檢測試劑盒(AFC)

          英文名稱:Caspase-2 Fluorescence Metric Assay

          產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T

          發(fā)貨周期:1~3天

          商品介紹:

          本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-2 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中Caspase-2 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-2 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-2 由兩個大亞基和兩個小亞基組成,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-2 熒光檢測試劑盒就是將Caspase-2 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-2 剪切后,發(fā)色基團(tuán)即游離出來,可通過熒光酶標(biāo)儀測定其熒光強(qiáng)度(激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm)。

          注意事項

          1. Caspase-2 Substrate 避光保存及使用。

          2. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-2 活化的機(jī)制,這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-2 活性無明顯改變,需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號通路。

          3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個或新鮮組織50~100mg,以便能達(dá)到測定需要的100~200μg 蛋白的要求,因為Caspase-2 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān),如測定的RFU 值偏低,可以通過適當(dāng)延長反應(yīng)的時間,如果值還是不高,可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

          大內(nèi)皮(Big ET)英文名稱:Big ET ELISA Kit溶血磷脂?;D(zhuǎn)移D抗體包裝1g

          大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)英文名稱:Acta2/Actsa/Actvs ELISA Kit載脂蛋白E3抗體包裝250mg

          催乳抑制激(PIH)英文名稱:PIH ELISA KitABI基因家族2抗體包裝1g

          催乳釋放激(PRH)英文名稱:PRH ELISA Kit氧化蛋白質(zhì)解包裝5g

          催乳(PRL)英文名稱:PRL ELISA Kit鐵調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝500mg

          催產(chǎn)(OT)英文名稱:OT ELISA Kit乙脫氫1型抗體包裝50mg

          促有絲分裂因子(MF/MPF)英文名稱:MF/MPF ELISA KitAFP4a蛋白抗體包裝1g

          促性腺激釋放激(GnRH)英文名稱:GnRH ELISA KitRho GTP激活蛋白32抗體包裝250mg

          促生長激釋放激(GHRH)英文名稱:GHRH ELISA Kit能量平衡相關(guān)蛋白抗體包裝5g

          促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)英文名稱:CRF ELISA Kit禽腦脊髓炎病AEV抗體包裝5mg

          促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)英文名稱:ACTH ELISA Kit腺苷環(huán)化7抗體包裝25g

          促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)英文名稱:CRH ELISA Kit腺苷環(huán)化4抗體包裝5g

          促卵泡(FSH)英文名稱:FSH ELISA Kit腺苷活化蛋白激γ1抗體包裝1g

          促狀腺釋放激(TRH)英文名稱:TRH ELISA Kit芳香N-乙酰化轉(zhuǎn)移抗體包裝1g

          促狀腺(TSH)英文名稱:TSH ELISA Kit腺苷環(huán)化8抗體包裝1g

          三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)AR-A014418 is an ATP-competitive, and selective GSK3β inhibitor with IC50 and Ki
          Caspase 2熒光法檢測試劑盒(AFC)丁香假單胞 4-羥基-6-氯喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白酶8檢測試劑盒

          異常威克漢姆酵母 6--4-羥基喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白酶9檢測試劑盒

          假交替單胞屬 2-甲氧基-3-硝基-4-甲基吡啶基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1檢測試劑盒

          棲土曲霉 1-乙酰-4-基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2檢測試劑盒

          蜥蜴纖細(xì)芽孢桿 2-(1H-吡唑-1-基)乙酸基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3檢測試劑盒

          釀酒酵母 5-氯-6-甲基尿嘧啶基質(zhì)裂解蛋白;基質(zhì)溶素檢測試劑盒

          *櫻桃鏈格孢 1-(3-甲氧基苯基)哌基質(zhì)裂解素檢測試劑盒

          金龜子綠僵 N,N-二甲基1,4-丁烷二基質(zhì)衍生因子1檢測試劑盒

          釀酒酵母 4-甲基-2-戊基-1,3-二氧戊環(huán)基質(zhì)衍生因子1α檢測試劑盒

          Sphingobium rhizovicinum 2-氯-5-甲氧基苯并咪唑基質(zhì)衍生因子1β檢測試劑盒

          大腸埃希氏 3,4-二甲氧基甲酯基質(zhì)相互作用分子1檢測試劑盒

          小孢擬盤多毛孢 N-Boc-4-亞甲基激活素A檢測試劑盒

          盤長孢狀盤孢 2'-F-Ac-dC亞磷酰單體敏感性脂肪酶檢測試劑盒

          玫煙色棒束孢 N-乙?;?5'-O-[雙(4-甲氧基苯基)苯基]-2'-脫氧-2'-氟胞苷激肽釋放酶10檢測試劑盒

          豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS3 3-氟-2-甲基吡啶激肽釋放酶11檢測試劑盒


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