詳細介紹
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱:人GAPDH基因核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
貨號:GOY-M6584
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
Rabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml*
MLLT11 髓系/淋巴或混合型白病11抗體 規(guī)格: 0.2ml*
phospho-SCNN1B(Thr615) 磷酸化上皮鈉通道β2抗體 規(guī)格: 0.1ml*
RNF32 環(huán)指蛋白32抗體 規(guī)格: 0.2ml*
PATZ1 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子MAZR抗體 規(guī)格: 0.2ml*
phospho-ICAM1(Tyr512) 磷酸化細胞間粘附分子1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Substance P Receptor/NK1R P物質(zhì)受體抗體 規(guī)格: 0.1ml*
AF7 瘤壞死因子受體相關(guān)因子7抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml*
TEF4/TEA domain family member 2 轉(zhuǎn)錄增強因子TEF4抗體 規(guī)格: 0.2ml*
IL-4I1 白細胞介素4誘導蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
EBP50/SLC9A3R1 細胞骨架連接質(zhì)膜蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
ASTN2 星形肌動蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-BAP1(Ser592) 磷酸化易感基因1抗體(人) 規(guī)格: 0.1ml*
Phospho-Syk (Tyr525/526) 磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體 規(guī)格: 0.1mlPIGA 紅細胞磷脂酰肌醇聚糖A抗體 規(guī)格: 0.2ml*
C3a/C3a anaphylatoxin 補體C3a過敏毒素抗體 規(guī)格: 0.1mlCreatine Kinase MM 肌酸激酶M型抗體 規(guī)格: 0.2ml*
人GAPDH基因核酸檢測試劑盒大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA Kit
Medium for chlorate respirers
pcDNA6.2/C-EmGFP-DEST(pcDNA6.2CEmGFPDEST)
人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA Kit
絲狀真線粒體DNAout
pLenti-EF1a-C-tGFP(pLentiEF1aCtGFP)
13 特殊細胞染色
大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA Kit
Desulfobacter sp. Medium (fumarate)
pATH23
人髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA Kit
凝膠法內(nèi)毒素半定量試劑盒
pMCSG17
Cyclohexanone(環(huán)己酮)
乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒