注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
商品介紹:
測(cè)定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關(guān)。
正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時(shí),活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導(dǎo)致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。
因此,通過檢測(cè)活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。
測(cè)定原理:
熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)了利用熒光法直接定量檢測(cè)線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。
需自備的儀器和用品:
多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:操作時(shí)間短,48-50T,可測(cè)40例樣本左右,96-100T,可測(cè)80例樣本左右; 2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè),部分試劑盒取樣多少請(qǐng); 3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效; 4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好; 5、回收試驗(yàn): X =99%; 6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng); 7、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測(cè)植物,歡迎咨詢。 |
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒香蜂草苷1-烷 99%4-(1-羥乙)吡啶 98%
狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒香荊芥酚殼聚糖 脫乙酰度≥95%, ,粘度100-200 mpa.s4(5)-羥咪唑鹽鹽 98%
血管緊張素原(aGT)試劑盒香蘭素羧化殼聚糖 BR,水溶性(R)-3-羥吡咯烷鹽鹽 98%
血管緊張素原(aGT)試劑盒香蒲新苷殼聚糖 低粘度:<200 mPa.s4-苯酯 98%
血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒香葉殼聚糖 中粘度200-400 mPa.s2-苯酯 98%
血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒香葉木素殼聚糖 高粘度>400 mPa.s3--4-氨吡啶 95%
卵泡抑素(FS)試劑盒香葉木素-7-O-葡萄糖苷D(+)-氨葡萄糖鹽鹽 ≥99%吲哚-2-羧 98%
卵泡抑素(FS)試劑盒香紫蘇D(+)-氨葡萄糖鹽鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品吲哚-3-羧 98%
狀腺素抗體(TAb)試劑盒香紫蘇二亞砜 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)1-環(huán)戊 99%
狀腺素抗體(TAb)試劑盒香紫蘇內(nèi)酯維K3 分析標(biāo)準(zhǔn)品1--3-吲哚 97%
兒茶酚(CA)試劑盒消旋山莨菪萘醌 98%5-異噁唑-4- 98%
兒茶酚(CA)試劑盒小白菊內(nèi)酯1000℃節(jié)能箱式電爐 SX-G071033,3-二烯酯 98%
半胱氨蛋白抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒小檗三正丁氧化膦 95%3--4- 99%
半胱氨蛋白抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒小檗紅黃芩苷 90%3-(5--1,2,4-噁二唑-3-)苯 97%
乙酰膽受體抗體(AChRab)試劑盒小檗紅硫酯肌 99%4-(5--1,2,4-噁二唑-3-)苯 97%
乙酰膽受體抗體(AChRab)試劑盒小檗硫代硫銨 60%溶液6-吲哚 98%
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)熒光法豬煙酰腺嘌呤二核苷磷氧化1(NOX1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒無水化金2--5-氟嘧啶 97%鍺 Φ7mm高(厚)2.5mm(厚)5mm 圓柱體Ge≥99.999%
豬神經(jīng)肽Y受體Y5(NPYR5)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒無水化金2,2-二琥珀 98%鍺 5mm×5mm 厚2mm 正方形 Ge≥99.999%
豬賴氨酰氧化樣蛋白4(LOXL4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒化鉛2,2-二琥珀酐 98%鍺 5mm 圓珠 中間穿孔 Ge≥99.999%
豬質(zhì)衍生因子4(SDF-4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒化銀2,2-二氟-1,3-苯并二噁茂 95%鍺粒 99.999% metals basis,2000目
豬趨化因子C-C-元配體1(CCL1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒化銀2,4-二-5-嘧啶 98%鍺粒 99.99% metals basis,1mm
豬肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 化銣4-氟吡啶鹽鹽 98%氧化鍺 SP
豬不對(duì)稱二精氨(ADMA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 化銣高哌 98%氧化鍺 99.99% metals basis,200目
豬GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒無水三化釕吡啶氫氟鹽 65 - 70 % (HF)硫銅,五水 ACS,98.0-102.0%
豬可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒無水三化釕三硅烷 97%氧化鋇 AR,97.0%
豬結(jié)腸癌抗原(CCA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 水合三化釕異喹啉-5-磺 95%氧化鋇 99.5%
豬色素P450家族成員21B(CYP21B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 水合三化釕2-琥珀 99%氧化鋇 SP
豬α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 化鈰2-琥珀酐 98%氧化鋇 99.95% metals basis
豬載脂蛋白C4(ApoC4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 化鈰4-巰吡啶 96%鋇 99.9% metals basis
豬B-淋巴趨化因子(BLC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 化鈰2-苯丁 99%水質(zhì)鋇標(biāo)樣 濃度范圍:0.834(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品
豬粒特異性抗核抗體(GSANA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 無水化鈰苯琥珀酐 99%鋇 99%
豬白介素1受體II(IL-1R2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒無水化鈰4-苯嗎啉 98%硫鈰,四水 AR,98%