莢膜染色液(墨汁法)公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC 熒光標(biāo)記化核因子κB激alpha/beta抑制劑抗體IgG靛藍(lán) AR,90%
phospho-IKK beta (Tyr466) /FITC 熒光標(biāo)記化核因子κB激beta抑制劑抗體IgG靛紅 AR
phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

色英文名稱： Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate磷化PDZ連接激/T-LAK源蛋白激抗體包裝5g

沙利度（反應(yīng)停）英文名稱： Melezitose monohydrate磷化3磷肌依賴性蛋白激1包裝10g

英文名稱： Mepiquat chloride星形膠質(zhì)PEA15抗體包裝1g

舒林英文名稱： Metaphosphoric acid轉(zhuǎn)錄因子RPF1抗體包裝500mg

舒洛芬英文名稱： Methyl cinnamate蛋白磷2A抑制劑1抗體包裝100g

雙芬英文名稱： Methyl dihydrojasmonate橋粒相關(guān)蛋白DRS抗體包裝25g

雙芬鈉英文名稱： Methyl indole-4-carboxylate抑癌蛋白DLP1抗體包裝5g

雙楊酯;楊-2-羧基酯英文名稱： Methylene green zinc chloride double salt蛋白激C delta結(jié)合蛋白抗體包裝1g

順磺阿曲庫(kù)銨英文名稱： Methylene violet 3RAX鴨型肝炎病聚蛋白抗體包裝1mg

蘇拉明鈉英文名稱： Methylsuccinic acid前列腺E2抗體包裝1g

索非那新琥珀鹽英文名稱： MH, maleic hydrazide多效生長(zhǎng)因子抗體包裝5g

他扎羅汀英文名稱： Molybdenium powder轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子MAZR抗體包裝100g

碳司維拉姆英文名稱： Molybdenium(IV) sulfide凋亡相關(guān)蛋白6抗體包裝25g

特非那定英文名稱： NAA-Na, 1-naphthaleneacetic acid sodium saltPSD95相關(guān)緊密連接蛋白PATJ抗體包裝100g

特立英文名稱： N-Acetyl-DL-valine血小板源性生長(zhǎng)因子AA+BB抗體包裝25g

柿尾孢菌Cercospora│kaki Ellis & Everh. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR核糖核試劑盒D-阿拉伯糖;Adonito

淺黃金色單胞菌Chryseomonas│luteola 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR核仁纖維蛋白抗體試劑盒艾黃;Artemisetin

嗜熱地芽孢桿菌Geobacillus│kaustophilus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品核基質(zhì)蛋白22試劑盒β-桉葉;β-Eudesmol
莢膜染色液(墨汁法)大腸埃希氏 5-氨基-1H-1,2,4-三氮唑-3-羧酸甲酯幾丁質(zhì)3樣蛋白1Elisa

琉球曲霉 2,2,3,4,4,4-六氟丁基 甲基烯酸鹽微管相關(guān)蛋白輕鏈3IElisa

近綠曲霉 2-氟煙瓜氨酸組蛋白H3Elisa

綠垂曲霉 2,4-二-6-甲氧基-1,3,5-三Ⅳ型肽精氨酸脫亞氨基Elisa

球毛殼 2--6-氟苯ATP合成Elisa

直絲淡藍(lán)褐鏈霉 N-甲基庚Lys63特異性去泛化BRCC36Elisa

大腸埃希氏 聚[4-二乙酰氧基基苯乙烯]脂磷壁酸Elisa

單孢蟲道酵母 3-溴-4-基補(bǔ)體蛋白1Elisa

橘色硬皮馬勃 N,N-二乙基-2,2,2-三氟乙酰補(bǔ)體蛋白5Elisa

蛛網(wǎng)不顯枝霉中華變種 2.6-二甲基-4-甲氧基苯酸補(bǔ)體蛋白2Elisa

需土節(jié)桿 2,5-二-3-噻吩甲酸補(bǔ)體蛋白5b-9Elisa

葡萄球?qū)?/span> 1-癸基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽色氨酸Elisa

草假單胞 2,5-二苯并惡唑內(nèi)皮特異性分子Elisa

豌豆根瘤 2,6-二苯并噁唑羥賴氨酸吡啶啉Elisa

沙漠奇異球 8-溴-7-甲氧基喹啉基質(zhì)金屬蛋白12Elisa