商品介紹:
用途: 肌纖維染色,可區(qū)分肌纖維和膠原纖維 注意事項: 肌纖維和肌上皮細胞呈玫瑰紅色,膠原纖維呈黃色。 儲存條件:4℃,避光,12個月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:肌纖維染色液(Puchtler鞣酸偶氮熒光桃紅法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:5×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鵝不食草(標準品)英文名稱: 6-O-Benzylguanine(O6BG)JWA蛋白抗體包裝100g
厄弗酚英文名稱: Hypocrellin連接蛋白JPH3抗體包裝25g
餓螞蝗(標準品)英文名稱: Fluorometholone連接粘附分子C抗體包裝5g
蒽醌(標準品)英文名稱: Fluorometholone蛋白質(zhì)酪激JAK-1抗體包裝100g
兒茶(兒茶)(標準品)英文名稱: Acemetacin組蛋白去基化JMJ2A抗體包裝25g
兒茶沒食子酯英文名稱: Acemetacin組蛋白去基化JMJD5抗體包裝5g
二基庚烷A(標準品)英文名稱: Chlorpromazine HCl磷化γ連環(huán)蛋白抗體包裝1g
二羥茶堿(標準品)英文名稱: Chlorpromazine HClJNK相互作用蛋白4抗體包裝5g
二氫丹參I(標準品)英文名稱: Dirithromycin基末端激1/2抗體包裝1g
二氫辣椒堿(標準品)英文名稱: Dirithromycin基末端激1/2/3抗體包裝1g
二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標準品)英文名稱: (2S)-2-amino-5-[(N,N'-dimethylcarbamimidoyl)amino]pentanoic acid基末端激1/3抗體包裝25g
二氫歐山芹當歸酯(標準品)英文名稱: Ceftizoxime sodium連接蛋白JPH4抗體包裝5g
二氫小檗堿(標準品)英文名稱: Ceftizoxime sodium組蛋白去基轉(zhuǎn)移JMJD7抗體包裝1g
二氫楊梅(標準品)英文名稱: Pyrogallol磷化原癌基因c-Jun抗體包裝1g
二氫醉椒英文名稱: Trametinib (GSK1120212)磷化活化蛋白激D抗體包裝10MG
: Bt0266資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品抗組?;鵷RNA合成,質(zhì)試劑盒胡椒堿;Piperine
NBRC13957=ATCC14485資源名稱: 嗜熱鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR抗內(nèi)膜抗體試劑盒高熊果酚苷;
: ATCC43964資源名稱: Hyphomonasjohnsonii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品抗滋養(yǎng)膜抗體試劑盒甘草次十八酯;Stearyl glyc
肌纖維染色液(Puchtler鞣酸偶氮熒光桃紅法)突孢毛殼 磷酸胍分支也交支鏈淀粉Elisa
產(chǎn)黃青霉 5-三氟甲基尿嘧啶結(jié)合態(tài)淀粉合成Elisa
大腸埃希 DL-3-氨基丁酸淀粉分支Elisa
季也蒙假絲酵母 酸性大紅GR可溶性淀粉合成Elisa
巴西果小克銀漢霉 己酸戊酯腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化Elisa
Pseudomonas tremae 4-甲基磺酰苯甲賴氨酰氧化Elisa
吉氏根瘤 N-(4-溴丁基)鄰苯二甲酰亞賴氨酰氧化1Elisa
洋蔥伯克霍爾德氏 2-甲氧基-1-萘賴氨酰氧化2Elisa
出芽短梗霉 正戊基苯賴氨酰氧化3Elisa
異常威克漢姆酵母 3-苯氧基-1,2-脫鎂葉綠Elisa
大腸埃希氏 4-甲磺?;迤S磷酸甘油酸激Elisa
黑曲霉 (S)-3-羥基丁酸甲酯BCA蛋白Elisa
Cystofilobasidium 4-氨基苯甲酰肼壁酸性轉(zhuǎn)化Elisa
黑曲霉 2-乙酯色P450羥化Elisa
球孢白僵 5-氨基-2-氯吡啶木質(zhì)過氧化Elisa