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          上海谷研實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>>Caspase 6熒光法檢測試劑盒(AFC)

          Caspase 6熒光法檢測試劑盒(AFC)

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          更新時間:2022-04-21 11:18:55瀏覽次數(shù):385

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

          產品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T|50T|100T
          貨號 GOY-01X9577 應用領域 化工
          主要用途 公司產品僅供科研 英文名稱 Caspase-6 Fluorescence Metric Assay
          Caspase 6熒光法檢測試劑盒(AFC)公司*的產品:CBP/CREBBP CREB結合蛋白抗體草 ≥99.9999% (metals basis)
          HP1 gamma 異染色質蛋白1-γ抗體四十八烷 Standard for GC,≥99.0% (GC)
          Phospho-HP1 gamma (Ser83) 化染色質相關蛋白1-γ抗體α-氧代-2-呋喃 97%
          CBX5 CBX5

          詳細介紹

          商品介紹:

          本試劑盒適用于培養(yǎng)細胞及新鮮組織Caspase-6 檢測。Caspase 家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中Caspase-6 為關鍵分子,與DNA 斷裂、染色質凝聚和凋亡小體形成有關。Caspase-6 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-6 裂解相應的胞漿胞核底物,導致細胞凋亡。Caspase-6熒光檢測試劑盒就是將Caspase-6 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團。當?shù)孜锉籆aspase-6 剪切后,發(fā)色基團即游離出來,可通過熒光酶標儀測定其熒光強度(激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm)。

          注意事項

          1. Caspase-6 Substrate 避光保存及使用。

          2. 對某些凋亡誘導劑引起的細胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-6 活化的機制,這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-6 活性無明顯改變,需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。

          3. 細胞數(shù)量需達到3~5×106 個或新鮮組織50~100mg,以便能達到測定需要的100~200μg 蛋白的要求,因為Caspase-6 的活性與細胞裂解液的蛋白含量有關,如測定的RFU 值偏低,可以通過適當延長反應的時間,如果值還是不高,可通過增加細胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。

          產品屬性:

          中文名稱:Caspase 6熒光法檢測試劑盒(AFC)

          英文名稱:Caspase-6 Fluorescence Metric Assay

          產品規(guī)格:20T|50T|100T

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產品僅用于科研

          細胞生物學研究有以下幾個方面:

          細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:

          ①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

          ②生物膜與細胞器的研究;

          ③細胞骨架體系的研究;

          ④細胞增殖及其調控;

          ⑤細胞分化及其調控;

          ⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細胞的起源與進化;

          ⑧細胞工程.

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

          2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結果分析

          a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

          胞內離子通道蛋白1(CLIC1)英文名稱:CLIC1 ELISA Kit粘附分子IgG樣結構域蛋白1抗體包裝500g

          胞漿型磷脂A2(cPLA2)英文名稱:cPLA2 ELISA Kit卡爾曼綜合癥基因1抗體包裝100mg

          半乳糖凝集-3(Gal-3)英文名稱:Gal-3 ELISA Kit含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體包裝1g

          半乳糖6硫酯(Gal-6S)英文名稱:Gal-6S ELISA Kit含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體包裝1g

          半胱天冬蛋白(caspase-3)英文名稱:caspase-3 ELISA Kit含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體包裝5g

          半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)英文名稱:Cys-C ELISA Kit鈉ATP通道蛋白抗體包裝1g

          百白破抗體(DPT)英文名稱:DPT ELISA KitAGXT2L2蛋白抗體包裝25g

          白血病抑制因子受體(LIFR)英文名稱:LIFR ELISA Kitβ淀粉樣蛋白胞內結構域相關蛋白1抗體包裝5g

          白血病抑制因子(LIF)英文名稱:LIF ELISA Kit錨蛋白重復及SAM結構域蛋白6抗體包裝1g

          白細胞活化黏附因子(ALCAM)英文名稱:ALCAM ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉移3抗體包裝250mg

          白三烯E4(LTE4)英文名稱:LTE4 ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉移5抗體包裝1g

          白三烯D4(LTD4)英文名稱:LTD4 ELISA Kit腺苷單磷脫1抗體包裝5g

          白三烯C4(LTC4)英文名稱:LTC4 ELISA Kit紅蛋白Ank1抗體包裝1g

          白三烯B4(LTB4)英文名稱:LTB4 ELISA Kit腺苷琥珀裂解抗體包裝100g

          白介9(IL-9)英文名稱:IL-9 ELISA Kitα1B糖蛋白抗體包裝25g

          血管緊張原抗體骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一種ATP-競爭性的 Aurora kinase 抑制劑,作用于 Aurora A,Aurora B 和 Aurora C,IC50 分別
          Caspase 6熒光法檢測試劑盒(AFC)土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯結合珠蛋白檢測試劑盒

          膠孢 二氫獼猴桃內酯結核桿IgG抗體檢測試劑盒

          傳染性支氣管炎病 3,4-二氟苯-1,2-二睫狀神經營養(yǎng)因子檢測試劑盒

          根霉屬的 4-氯異喹啉解脲脲原體抗體檢測試劑盒

          猴頭 2-氯甲基-3-甲基-4-(3-甲氧氧基)吡啶鹽酸鹽解整合素樣金屬蛋白酶12檢測試劑盒

          色褐鏈霉 鹽酸去甲苯福林解整合素樣金屬蛋白酶33檢測試劑盒

          *美味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合素樣金屬蛋白酶9檢測試劑盒

          香菇 4,5-二溴-1H-1,2,3-三氮唑金黃色葡萄球腸素檢測試劑盒

          魯氏毛霉 1-甲巰基環(huán)基乙酸甲酯金黃色葡萄球腸素A檢測試劑盒

          糾纏青霉 1-羥甲基環(huán)基乙金黃色葡萄球蛋白A檢測試劑盒

          腐皮鐮孢 四氟酸亞鐵(II)金葡腸素檢測試劑盒

          阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金屬硫蛋白檢測試劑盒

          淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金屬肽酶含血小板反應蛋白1檢測試劑盒

          玫紅假裸囊 5-氨基-1,2,4-噻二唑鹽酸鹽金屬肽酶含血小板反應蛋白5檢測試劑盒

          乳酒假絲酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯緊密連接蛋白檢測試劑盒 

           


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