商品介紹:
(S)-(+)-Rolipram是cAMP特異的PDE4抑制劑,有抗炎活性,活性小于其R型對(duì)映體。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):85416-73-5 別名:(+)-Rolipram;(S)-Rolipram 純度:99.85% 分子量:275.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PDE4抑制劑((S)-(+)-Rolipram)
英文名稱:(S)-(+)-Rolipram
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
路德酵母7號(hào)染色體開放閱讀框13抗體Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒
藍(lán)色犁頭霉7號(hào)染色體開放閱讀框29抗體Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
貪噬菌屬8號(hào)染色體開放閱讀框72抗體Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) ELISA Kit人巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒
賴芽孢桿菌7號(hào)染色體開放閱讀框30抗體Human CD5L(CD5 antigen-like) ELISA Kit人巨噬集落激因子受體(M-CSFR)免疫試劑盒
奇異球菌7號(hào)染色體開放閱讀框57抗體Human FAM3B(Protein FAM3B) ELISA Kit人巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒
膠紅酵母7號(hào)染色體開放閱讀框36抗體Human MYOF(Myoferlin) ELISA Kit人巨噬激蛋白(MSP)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○1547號(hào)染色體開放閱讀框42抗體Human GFRA1(GDNF family receptor alpha-1) ELISA Kit人巨泌乳免疫試劑盒
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種7號(hào)染色體開放閱讀框43抗體Human GLIPR1(Glioma pathogenesis-related protein 1) ELISA Kit人鹽抵抗的性磷(TRAP)免疫試劑盒
冷海水黃桿菌7號(hào)染色體開放閱讀框44抗體Human HSD3B1(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta 5–>4-isomerase type 1) ELISA Kit人相關(guān)抗原9(SPAG9)抗體免疫試劑盒
暗產(chǎn)色鏈霉菌*8號(hào)染色體開放閱讀框40抗體Human ATG12(Ubiquitin-like protein ATG12) ELISA Kit人相關(guān)抗原7(SPAG7)免疫試劑盒
亮白曲霉8號(hào)染色體開放閱讀框37抗體Human FOLR2(Folate receptor beta) ELISA Kit人精脒/精N(1)-乙酰轉(zhuǎn)移樣蛋白1(SATL1)免疫試劑盒
枇杷葉點(diǎn)霉8號(hào)染色體開放閱讀框45抗體Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) ELISA Kit人精合成(SRM)免疫試劑盒
膠柱頭孢霉屬8號(hào)染色體開放閱讀框80抗體Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) ELISA Kit人精酰-tRNA合成(RARS)免疫試劑盒
Paenibacillus taichungensis9號(hào)染色體開放閱讀框3抗體Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) ELISA Kit人精脫羧(ADC)免疫試劑盒
植物乳桿菌8號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Human NOTCH2(Neurogenic locus notch homolog protein 2) ELISA Kit人精2(ARG2)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌8號(hào)染色體開放閱讀框48抗體Human NOTCH4(Neurogenic locus notch homolog protein 4) ELISA Kit人精(Arg)免疫試劑盒
尖鐮孢萎蔫?;停藁菸【?/span>Fusarium│oxysporum f. sp. vasinfectum 質(zhì)量規(guī)格:IND Liprin alpha 1 ELISA Kit三七皂苷R2(S型)
藍(lán)色鏈霉菌Streptomyces│cyaneus 質(zhì)量規(guī)格:IND KIAA1199 ELISA Kit異夏佛塔苷
假木豆根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:AR,90%白頭翁皂苷E-3
PDE4抑制劑((S)-(+)-Rolipram)磷肌3激(PI3K)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PI3K ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝25g
磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:pAMPK ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白9A抗體包裝5g
磷化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激(p-ERK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:p-ERK ELISA Kit縮C抗體包裝500mg
磷化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:pERK ELISA Kit谷草轉(zhuǎn)抗體包裝100g
磷化酪蛋白激JAK3(pJAK3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:pJAK3 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體包裝25g
磷化核因子-κB(p-NF-κB)檢測(cè)試劑盒英文名稱:p-NF-κB ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體包裝500g
磷化蛋白激C(P-PKC)檢測(cè)試劑盒英文名稱:P-PKC ELISA Kit?;摎溟L(zhǎng)鏈抗體包裝25g
磷化蛋白激B(P-PKB)檢測(cè)試劑盒英文名稱:P-PKB ELISA Kit?;摎渲墟溈贵w包裝5g
磷化表皮生長(zhǎng)因子受體(pEGFR)檢測(cè)試劑盒英文名稱:pEGFR ELISA Kit?;摎涠替溈贵w包裝1g
磷化基末端蛋白激(P-JNK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:P-JNK ELISA Kit過氧化物?;趸?抗體包裝25g
細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g
細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)檢測(cè)試劑盒英文名稱:LFA-3/CD58 ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱和絲富含核蛋白1)包裝1g
亮腦啡肽(Leu-ENK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Leu-ENK ELISA Kit有絲分裂激A/B/C抗體包裝5g
粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GM-CSF ELISA Kit蛋白酪激ATK抗體包裝1g
粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)檢測(cè)試劑盒英文名稱:G-CSF ELISA Kit長(zhǎng)鏈脂肪連接1/2抗體包裝1g