產(chǎn)品屬性:
中文名稱:蘇丹Ⅲ染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:3×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 中性脂肪染色,主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著。 注意事項: 主要由蘇木素染液、蘇丹三號染液、分化液等組成,需用冰凍切片,染色后脂肪呈橘紅色,細胞核呈淡藍色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
紫蓳靈(標準品)英文名稱: tribendimidine活化T核因子1蛋白抗體包裝1g
紫荊皮(標準品)英文名稱: Jionoside B1谷受體1抗體包裝5g
紫萁(標準品)英文名稱: N6022神經(jīng)元抑制蛋白抗體包裝100g
紫色姜(標準品)英文名稱: Balsalazide神經(jīng)發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體包裝25g
紫杉(標準品)英文名稱: Epalrestat 核因子κB抑制蛋白α抗體(IκB-α)包裝25g
紫蘇梗(標準品)英文名稱: Olsalazine disodium磷化核因子NF-κB p65抗體包裝5g
紫蘇(標準品)英文名稱: Olsalazine disodium磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體包裝1g
紫蘇烯英文名稱: Pioditazone hydrochloride磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體包裝250mg
紫蘇葉(標準品)英文名稱: Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine核酪蛋白激和周期蛋白依賴性激底物1抗體包裝5g
紫蘇子(標準品)英文名稱: IopromideNIFK蛋白抗體包裝100g
紫檀芪(標準品)英文名稱: TRISTEARIN磷化NIFK抗體包裝500g
紫檀香(標準品)英文名稱: Tizanidine hydrochloride核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
紫菀(標準品)英文名稱: Tubastatin A Hydrochloride膜磷脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體包裝25g
紫菀(標準品)英文名稱: Moxonidine hydrochloride神經(jīng)降壓受體1抗體包裝5g
紫云英苷(標準品)英文名稱: Propiverine hydrochloride神經(jīng)降壓受體2抗體包裝25g
地生隱球酵母Cryptococcus│terreus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品激肽釋放8試劑盒胞嘧啶;Cytosine
那波鏈霉菌Streptomyces│narbonesis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR激肽釋放7試劑盒D(+)-半乳糖;D-Galactose
戴爾根霉Rhizopus│delemar 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,一合物激肽釋放6試劑盒7-表-10-去乙?;仙?Deace
蘇丹Ⅲ染色液鉆特省芽孢桿 2--5-吡啶乙膜結(jié)合HLA-G亞型Elisa
EC600* 4-氨基-3-三氟甲苯膜結(jié)合HLA-E亞型Elisa
塔賓曲霉 1-苯基環(huán)戊烷羧酸胰高血糖樣肽Elisa
巴氏醋桿 2-氨基-4-羥基-6-甲基嘧啶四氫Elisa
巴氏生孢八疊球 3-基-4-氟苯酸頻吶酯亞甲基四氫還原抗體Elisa
根瘤 N-Boc-溴乙胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子Elisa
嗜冷桿 (S)-芐基丁二酸糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白Elisa
紫晶臘蘑 2-基-4-氟苯甲半乳糖苷Elisa
淡紫擬青霉 1-叔丁基-4-苯葡萄糖苷Elisa
微管螺旋鏈霉 5-氟-2-阿拉伯糖苷Elisa
仰光鏈霉 2-乙?;?1-乙基吡咯單氧化AElisa
鐮刀屬 鄰氟甲酯1,4,5-三磷酸肌Elisa
鴨疫里氏桿 2-溴-6-仙臺病Elisa
粘質(zhì)沙雷氏 2--4-溴前白蛋白Elisa
塔里木類芽孢桿 4-氨基-2-甘膽酸Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)