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詳細(xì)介紹
商品介紹：
熒光染料PKH67 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細(xì)胞，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。對細(xì)胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細(xì)胞膜，有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。 在細(xì)胞分裂增殖過程中，PKH67的熒光強(qiáng)度會隨著細(xì)胞的分裂而逐級遞減，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中，因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細(xì)胞增殖，細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中，PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半，通過流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測出未分裂細(xì)胞，分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度)，二次(1/4的熒光強(qiáng)度)，三次(1/8的熒光強(qiáng)度)，以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。 除了用于細(xì)胞增殖檢測，PKH67 還可以用于細(xì)胞的體外盒體內(nèi)示蹤，標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定，陽性標(biāo)記率達(dá)98%以上，標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好，能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況；或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi)，可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化。 PKH67標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長達(dá)數(shù)周之久，它常被用來做活體細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長期活動的實(shí)驗(yàn)。PKH67 毒性較小，不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患?？梢愿焖?，更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 PKH67標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。 PKH67標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=490 nm,λem=502 nm。 儲存條件：-20℃避光保存。 |
產(chǎn)品屬性：
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：500T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
阿利多(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Dexamethasone AcetateCD44V5抗體包裝25g
阿侖磷鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dexamethasone Acetate22號染色體開放閱讀框23抗體包裝5g
阿莫西林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Trimethoprim角蛋白19抗體包裝1g
阿尼西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Trimethoprim1號染色體開放閱讀框147抗體包裝5g
阿齊沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sivelestat sodium 膽固21-羥化抗體包裝1g
阿奇霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nevirapine畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端)包裝25g
阿米特（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nevirapine補(bǔ)體C1qL3鏈多肽抗體包裝5g
阿司咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sulfamethoxazole(SMZ)腫瘤/抗原27抗體（高遷移率族蛋白）包裝100g
阿糖腺苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sulfamethoxazole(SMZ)1號染色體開放閱讀框228抗體包裝25g
阿替洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cefpirome Sulfate碳酐3抗體包裝5g
阿托伐醌,阿托喹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cefpirome Sulfate親環(huán)蛋白（親環(huán)）PPIA抗體包裝1g
阿魏鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Amisulpride鈣網(wǎng)蛋白抗體包裝250mg
阿魏哌（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Amisulpride腫瘤/抗原65包裝5g
阿西美辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Fenofibric acid2號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
阿昔莫司，阿西莫司（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fenofibric acid伴侶蛋白9抗體包裝5g
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR,可用于培養(yǎng)血管生成4試劑盒Α-香樹脂;α-Amyrenone
沃遜納爾沙門氏菌Salmonella│wassenaar 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血管生成2試劑盒相思豆;L-Abrine
: HBUM84819資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%血管生成1試劑盒相思子堿;L-Abrine
PKH67細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒德沃斯氏 乙二二縮水甘油拓?fù)洚悩?gòu)1Elisa
Burkholderia metallica Vanlaere et al. 對乙氧基苯酸單酰基甘油酯Elisa
泡盛曲霉 5-二苯并環(huán)庚烯酮單?；视王lisa
枯草芽孢桿 萘普生SIGMAR1Elisa
假單胞 亞氨乙氧基乙烷 鹽酸鹽敏感性脂肪Elisa
大莖點(diǎn) 酮基布洛芬脂肪甘油三酯脂Elisa
仁果叢梗孢 5-氟-2-甲血管生成樣蛋白4Elisa
枯草芽孢桿 N-甲基-4-氯-2-吡啶甲酰甲酰肽受體1Elisa
美澳型核果褐腐病 1,3,5-三(溴甲基)-2,4,6-三蛋白信號調(diào)節(jié)因子7Elisa
橄欖色盤多毛孢 硫代異煙酰II型膠原纖維α基因Elisa
黑曲霉 2,3-二氯苯肼鹽酸鹽腸道病71型IgG抗體Elisa
白地霉 2-氨基-4-甲基-5-硝基吡啶神經(jīng)絲蛋白HElisa
岸海桿狀 2-氯-4-氟苯甲酰氯橋粒芯糖蛋白2Elisa
2-氨基聯(lián)苯鹽酸鹽分泌簇集蛋白Elisa
腸桿屬 四溴雙酚A-雙(2,3-二溴基)CD20分子抗體Elisa
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