以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
用途: 抗酸菌(諾卡菌和紅球菌等)染色,可鑒別抗酸菌與非抗酸菌 注意事項(xiàng): 抗酸菌或弱酸菌(諾卡菌和紅球菌等)呈紅色,非抗酸桿菌和背景呈淺藍(lán)色。主要由復(fù)紅液、脫色液、亞甲藍(lán)復(fù)染液組成。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
鹽普拉克索英文名稱: Sodium bismuthate過(guò)氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體包裝500g
鹽普拉克索無(wú)英文名稱: Sodium diatrizoate dihydrate過(guò)氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體包裝100g
鹽普魯英文名稱: Sodium fluoroaluminate朊病蛋白CD230抗體包裝100g
鹽普羅帕英文名稱: Sodium hippurate孕激受體β(MPRβ)抗體包裝500g
鹽普莫英文名稱: Sodium laurate前列腺F2a受體抗體PGF2αR包裝1g
鹽去羥英文名稱: Sodium metaaluminate泛基賴抗體包裝5g
鹽噻加賓英文名稱: Sodium metavanadate dehydrate核糖體p70 S6蛋白激抗體包裝1g
鹽賽庚啶英文名稱: Sodium n-caprylatep53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體包裝5g
鹽賽洛唑啉英文名稱: Sodium oxamateBcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝250g
鹽三拉英文名稱: Sodium phenyl phosphate, dehydrate磷脂爬行3抗體包裝5mg
鹽舍曲林英文名稱: Sodium-2-naphthalenesolfonate骨骼肌線粒體膜蛋白PARL抗體包裝10MG
鹽司來(lái)吉蘭英文名稱: Span* 20多核苷磷化蛋白抗體包裝100g
鹽司維拉姆英文名稱: Stains-All胃腸道相關(guān)酪激抗體(蛋白酪激5)包裝25g
鹽坦洛新/鹽坦索羅辛英文名稱: Strontium carbonatePEST含核蛋白抗體包裝5g
鹽溴己新英文名稱: Strontium sulfate磷化p53結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
褐紅小孔菌Microporus│affinis (Blume & T. Nees) Kuntze 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品胱抑B試劑盒磺間二氧嘧啶;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
: 29資源名稱: O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品胱抑A試劑盒鹽環(huán)沙星;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
鼠傷寒沙門氏菌Salmonella│typhimurium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)胱天蛋白激活的脫氧核糖核試劑盒脫氫乙-對(duì)照品;有報(bào)告
抗酸染色液(改良Kinyoun冷染法)深紅沙雷氏 2-乙氧亞甲基乙酰乙酸乙酯蕈堿型乙酰受體M1Elisa
金龜子綠僵 2-酮戊二酸胱硫γ-裂解Elisa
短乳桿 5-甲基-2,4-吡咯烷二酮胱硫β-裂解Elisa
發(fā)酵假絲酵母 (R)-3-氨基丁酸煙酰磷酸核糖基轉(zhuǎn)移Elisa
側(cè)毛殼 柑青硫酸乙酰肝Elisa
甲基桿屬 甲基烯酸氧雜環(huán)丁烷酯溶血OElisa
米根霉 喹啉-6-酸可溶性凋亡相關(guān)因子Elisa
多球大洋螺 4-(4-氟苯基)可溶性凋亡相關(guān)因子配體Elisa
南方散斑殼 全氟壬酸富組蛋白Elisa
釀酒酵母 2-氨基-5-溴-1,3,4-噻二唑高遷移率族蛋白Elisa
乳酸片球 乙氧基-二酸二乙酯封閉蛋白2Elisa
球孢鏈霉 5--2-氟-3-封閉蛋白Elisa
異常漢遜酵母 3-氟-2-甲氧基-6-25羥基膽固Elisa
巴氏醋桿 3-(2-吡啶基)-L-氨酸神經(jīng)型一氧化氮合成Elisa
根癌土壤桿 2-溴-5-氟-6-1-磷酸肌Elisa