Perenyi's脫鈣液公司正在出售的產(chǎn)品：CD55/DAF/FITC 熒光標(biāo)記衰變加速因子CD55抗體IgG4-羧-3-苯 97%
CD56/FITC 熒光標(biāo)記CD56抗體IgG3--5-氟苯 95%
CD56/NCAM1/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)粘附分子1抗體IgG4-羧-3-氟苯 98%
CD57/FITC 熒光標(biāo)記抗CD57抗體IgG4--2-(三氟)苯 97%
CD58/LFA-3

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

油（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glycochenodeoxycholic Acid Sodium Salt微管驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1A抗體包裝1g

隔山消（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： BGJ398(NVP-BGJ398)離子通道蛋白家族成員1抗體包裝25g

根皮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： BMN673離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體包裝5g

根皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Staurosporine離子通道蛋白家族成員2抗體包裝10g

功勞木（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Oxacillin sodiumG蛋白激活內(nèi)向通道5抗體包裝50g

鉤藤(鉤藤)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Oxacillin sodium離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝1g

鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： (±)-α-Tocopherol nicotinate抑癌蛋白EZH2抗體包裝25g

鉤吻（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fluorescein-5-maleimideDNA修復(fù)Ku70抗體包裝5g

鉤吻子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Veliparib (ABT888)DNA修復(fù)Ku-80抗體包裝100g

狗脊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nafcillin sodium salt monohydrate14號(hào)染色體開放閱讀框106抗體包裝25g

枸杞子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nafcillin sodium salt monohydrate腦蛋白9抗體包裝5g

枸櫞血根堿英文名稱： Atosiban Acetate通道相互作用蛋白2抗體包裝100g

構(gòu)骨葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Trelagliptin free base劍蛋白p60亞基A1抗體包裝25g

構(gòu)樹堿A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cefotaxime SodiumKazrin蛋白抗體包裝5g

古倫賓（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cefotaxime Sodium離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝1g

辣椒疫霉Phytophthora│capsici Leonian 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR抗信號(hào)識(shí)別顆粒54kDa蛋白試劑盒狗牙花堿D乙;Coronarin D

小孢根霉華變種Rhizopus│microsporus var. chinensis 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)抗心磷脂抗體IgM試劑盒狗牙花堿D;Coronarin D

鹽田菌Salinicola│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR抗心磷脂抗體IgG試劑盒高車前;hispidulin
Perenyi's脫鈣液松鼠葡萄球 4-溴芐脒鹽酸鹽百香果木質(zhì)化病Elisa

Pseudomonas batumici  3-羥基吡-2-酰葡萄糖氧化Elisa

少孢哈薩克斯坦酵母 1-(3-吡啶基)-3-(二甲氨基)-2-烯-1-酮泛化蛋白Elisa

玫煙色棒束孢 3,4-二氫-2(1H)-喹啉酮木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷Elisa

Bacillus sp. 3-甲氧基-2-甲酸抗性淀粉Elisa

海假交替單胞 3-氨基異煙酸甲酯抗超氧陰離子Elisa

多主葡萄殼 原卟啉二甲酯磷脂酸磷酸Elisa

芽胞桿 6-甲基吡-2-羧酸泛激活E3Elisa

多粘類芽孢桿 1,2,3,4-四氟苯延胡索酸Elisa

金黃色葡萄球金黃亞種 3-(2,4-二)酸鯊烯-2，3-環(huán)氧化物Elisa

釀酒酵母 4-甲基哌-1-甲酰氯鹽酸鹽O-乙酰絲氨酸硫水解Elisa

枯草芽孢桿 甘油磷酸酯二鈉鹽水合物(異構(gòu)體混合物)T4多聚核苷酸激Elisa

雞新城疫病血凝抑制試驗(yàn)（HI）陽性血清 2-乙基-3,5(或3,6)-二甲基吡脂氧合Elisa

黑曲霉 環(huán)基色P450氧化還原Elisa

黃桿 L-脯氨酸叔丁酯鹽酸鹽色P450氧化還原Elisa