產(chǎn)品屬性:
中文名稱:藍(lán)色標(biāo)本保色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2×250ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
注意事項(xiàng): 有硫酸銅、甘油、等組成。如出現(xiàn)沉淀,可過濾后再使用。在制作保色浸制標(biāo)本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴(yán)實(shí),并避免陽光直射。 儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
萊西氏菌屬布氏桿菌菌體蛋白抗體Human GALK2 ELISA Kit小鼠CD44分子(CD44)免疫試劑盒
褪色沙雷氏菌(粘質(zhì)沙雷氏菌)磷化B-Raf抗體Human GALNT4 ELISA Kit小鼠CD34分子(CD34)免疫試劑盒
水叢毛單胞菌磷化B-Raf抗體Human GALM ELISA Kit小鼠CD33分子(CD33)免疫試劑盒
土生隱球酵母多聚合苷激3磷化抗體Human GADD34 ELISA Kit小鼠CD30分子(CD30)免疫試劑盒
秀珍菇癌易感基因1抗體Human GABRG2 ELISA Kit小鼠CD19分子(CD19)免疫試劑盒
紫棕炭團(tuán)菌Bcl-2同源拮抗劑抗體Human GADD45A ELISA Kit小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)免疫試劑盒
嗜熱鏈球菌β3腎上腺能受體抗體Human GADD45GIP1 ELISA Kit小鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)免疫試劑盒
土生克雷伯氏菌腦鈉/利鈉肽抗體Human GAGE2D ELISA Kit小鼠Ca-ATP(Ca-ATPase)免疫試劑盒
馬昆德擬青霉BZW2蛋白抗體Human GAGE1 ELISA Kit小鼠B因子(BF)免疫試劑盒
布魯氏菌緩激肽B1受體抗體Human GAK ELISA Kit小鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒
釀酒酵母鈣激活通道蛋白α1抗體Human GAGE7 ELISA Kit小鼠B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒
彎曲芽孢桿菌卵黃狀黃斑病蛋白2抗體Human GABARAPL1 ELISA Kit小鼠B活化因子(BAFF)免疫試劑盒
解淀粉周培瑾氏菌絲/蘇蛋白激SAD-B抗體Human GABARAPL2 ELISA Kit小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)免疫試劑盒
可可球二孢鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體Human GALE ELISA Kit小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒
灰黃淺黃酵母腦肌激BCK抗體Human GAN ELISA Kit小鼠Apelin 免疫試劑盒
釀酒酵母β葡萄糖苷抗體Human GAPDHS ELISA Kit小鼠Apelin 13(AP13)免疫試劑盒
發(fā)光假蜜環(huán)菌(亮菌)Armillaria tabescens 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα-內(nèi)肽試劑盒3,5,6,7,8,3’,4’-七氧基
納豆芽孢桿菌Bacillus│natto 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα肌動(dòng)蛋白試劑盒25-羥基原人參二
宇佐美曲霉Aspergillus│usamii 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BSα-黑色激試劑盒3-氫化去氫松苓
藍(lán)色標(biāo)本保色液大腸埃希氏O抗原微量凝集定型血清診斷液 甲酸戊酯p53誘導(dǎo)基因3Elisa
大腸桿 N-α-羰基苯氧基-D-精氨酸PeriostinElisa
人參土成對(duì)桿 辛酸戊酯P糖蛋白;滲透性糖蛋白Elisa
白色金針菇 3-甲基-2-酸乙酯P物質(zhì)Elisa
孟氏假單胞 4-乙酰乙酸乙酯P選擇Elisa
大腸埃希 己酸己酯Ras同源基因家族成員AElisa
雞傷寒沙門氏 疊氮乙酸乙酯Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激1Elisa
微小桿 四氫糠乙酸酯Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2Elisa
串珠鐮孢 2-氟-5-甲R(shí)-脊椎蛋白1Elisa
交替紅色桿屬 2(3H)-4-氟苯并噻唑酮S100B蛋白Elisa
矮被孢霉 鄰乙酰氨基對(duì)酚S100蛋白Elisa
金耳 6-氟-2(3氫)苯噻唑酮S100鈣結(jié)合蛋白A8;A9復(fù)合物Elisa
釀酒酵母 鄰乙酰氨基對(duì)酚SKA2Elisa
豇豆慢生根瘤 苯炔酸Syndecan-1;CD138Elisa
藤倉鐮孢 6,8-二溴-咪唑[1,2-A]吡Tamm-Horsfall蛋白Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)