詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
3×100ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途: 神經(jīng)鞘磷脂染色,適用于恒冷組織切片和冰凍切片 注意事項: 屬于三價鐵蘇木素染色法,不易長期保存,有機溶劑脫脂后染色效果才佳。 儲存條件:室溫,避光,6個月 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
酯封端左旋聚乳(重均分子量137-170萬)英文名稱: Nordihydrocapsaicin抑瘤M抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量17-26萬)英文名稱: 4-(Methylamino)-antipyrine抑瘤M受體抗體包裝25g
酯封端左旋聚乳(重均分子量170-206萬)英文名稱: Hydrazine sulfate鋅指蛋白339抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量206-288萬)英文名稱: Hydrazine sulfate氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量26-36萬)英文名稱: Cyclandelate氧化應激反應蛋白1抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量3-5.5萬)英文名稱: Nitrilotriacetic acid固生蛋白M抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量36-48萬)英文名稱: 1,3- Propylene Glycol末端多聚腺苷1蛋白抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量48-73萬)英文名稱: Diethylene Glycol嗅球蛋白3抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量5.5-9 萬)英文名稱: Chlorothiazide轉(zhuǎn)錄因子OTX1抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量73-102萬)英文名稱: 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide轉(zhuǎn)錄因子OTX2抗體包裝1g
酯封端左旋聚乳(重均分子量9-17萬)英文名稱: Alkene轉(zhuǎn)錄因子OTX1+OTX2抗體包裝250mg
(3R,4R)-N,4-二基-1-(基)-3-...英文名稱: N-Methylparoxetine增食欲B/欲激B包裝5g
(R)-1-基-3-基丁基蒎烷二酯鹽鹽英文名稱: Sevoflurane鳥脫羧抗體包裝100mg
1,2-二基-5-羥基-3-乙酯;美卡比酯;英文名稱: DiaveridineO位N-乙酰葡萄糖OGT抗體包裝25mg
1,9-吡唑并蒽;SP600125英文名稱: Mestanolone少突膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子1包裝25g
淺黃新薩托菌Neosartorya│aureola 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定肌抑試劑盒百蕊草I;Kaempeerol-3-O
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR肌養(yǎng)蛋白試劑盒白蠟樹;Dimethylfraxeti
扣囊復膜孢酵母Saccharomycopsis│fibuligera 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品肌生成試劑盒白花前胡;Ulopterol
磷脂鐵蘇木素(FeH)染色液水稻節(jié)桿 2-氨基二苯砜甲基胞嘧啶雙加氧1Elisa
云芝栓孔(變色栓) 二酸叔丁酯系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgGElisa
山綠豆根瘤 2-溴-3-氟苯甲系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgAElisa
海陳文新氏 5--2-酰噻吩系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgMElisa
葡萄座腔 4-甲脒基吡啶鹽酸鹽表皮調(diào)節(jié)Elisa
總狀毛霉 1,2-二氟-4-(甲磺?;?苯卵黃球蛋白Elisa
大腸埃希 4,7,10-三氧-1,13-十三烷二雙鏈DNAElisa
根瘤 5,6,7,8-四氫-1-萘甲酸抗Elisa
鮑魚側(cè)耳 N-甲基羥鹽酸鹽鹽皮質(zhì)Elisa
樹舌靈芝 間苯二酚藍神經(jīng)損傷誘導蛋白2Elisa
Magnivallibacter 6-己酸肌肉生長抑制;肌抑Elisa
大腸埃希氏 3-氨基-5-溴絨毛膜促性腺Elisa
Vibrio variabilis 2,2,3,3,3-五氟L-乳酸Elisa
貝氏谷氨酸桿 3-氨基-5-溴谷氨酸脫羧自身抗體Elisa
距園毛霉 2,2,3,3,3-五氟蛋白3Elisa