詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml|500ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色 注意事項: 細胞核呈紫紅色或藍紫色,胞漿呈粉紅色,無需磷酸鹽緩沖液,直接使用。 儲存條件:室溫,24個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1-基海因鹽鹽;AHD,1-基乙內(nèi)酰脲鹽鹽英文名稱: Sodium Aminosalicylate Dihydrate陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體包裝5g
2-脫氧-L-胸苷/替比夫定英文名稱: Methylthioninium Chloride Trihydrate陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-3抗體包裝100g
3-氮雜雙環(huán)【3.3.0】辛烷鹽鹽英文名稱: Warfarin Sodium催產(chǎn)受體(縮宮受體)抗體包裝25g
4-ene-戊英文名稱: Warfarin Sodium緊密連接蛋白抗體包裝10g
5-基楊,美沙拉秦英文名稱: Lomustine卵巢癌免疫反應抗原抗體包裝50g
5-三基尿嘧啶英文名稱: Fluphenazine Decanoate大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體包裝1g
9-基米諾環(huán)鹽鹽英文名稱: Dobutamine Hydrochloride神經(jīng)叢蛋白B1抗體包裝100mg
Donepezil HCl (type I)英文名稱: 5,5-Diphenylhydantoin磷化蛋白激C(T410)抗體包裝1g
Donepezil HCl (type III)英文名稱: Adamantane磷化蛋白激C mu型抗體包裝1g
L-犬尿(標準品)英文名稱: Propafenone Hydrochloride磷化蛋白激C mu型抗體包裝250mg
LGD-4033英文名稱: Propafenone Hydrochloride表面受體PILRβ抗體包裝100g
Loperamide HCl英文名稱: Xanthene-9-carboxylic acid前列腺癌相關蛋白4抗體包裝25g
ML-176;SR-3335英文名稱: Xanthone線粒體導肽解β抗體包裝100g
R-鹽普拉克索英文名稱: Methyl eugenol富含脯蛋白15抗體包裝25g
Salubrinal英文名稱: Geraniol維生K依賴的蛋白C輕鏈抗體包裝5g
球孢白僵菌(斜面)Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:VE含量≥260.00mg/g as dl-α-tocopherol肌激同工MM試劑盒白花前胡;Praeruptorin
: HBUM6405資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,CP肌激同工MB試劑盒DL-薄荷;Menthol
中國布勒酵母Bullera│sinensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%肌激同工BB試劑盒白屈菜紅堿;Chelerythrine
姬姆薩染色液(Giemsa stain,即用型)卷枝毛霉 2-氨基-4-基吡啶Ca2+ATPElisa
釀酒酵母 2-乙基-N-TNFSF14Elisa
運動節(jié)桿 2-氨基-5-基吡啶過氧化物Elisa
發(fā)酵性酵母 N-甲基-3-苯基-3-羥基鈣調(diào)磷酸Elisa
鹽水球 3--4-甲氧基芐鹽酸鹽Slingshot同源物Elisa
唐菖蒲青霉 乙基乙炔鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激激Elisa
發(fā)根根瘤 4-溴甲酯鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激1DElisa
毛栓孔 S-Boc-2-巰基-4,6-二甲基嘧啶鈣調(diào)依賴蛋白激IIElisa
盤長孢* 2-溴-4,6-二單絲氨酸蛋白激1Elisa
庫氏類芽孢桿 1-甲酰基-3-甲磺?;?2-咪唑烷酮鈣調(diào)依賴蛋白激IVElisa
鱗蓋紅菇 2,5-二甲基噻唑組蛋白去乙酰化Elisa
有柄靈芝 2-溴-5-甲基噻唑前列腺A1Elisa
普通鏈孢囊 2-甲基-4-基噻吩II型膠原Elisa
根瘤 苯并呋喃-2-甲γ-氨基丁酸運載蛋白1Elisa
厚垣孢普可尼亞 1-甲基-4-咪唑甲酸內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)