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          XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑

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          更新時間:2022-04-21 11:27:19瀏覽次數(shù):553

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500T|1000T
          貨號 GOY-01X9588 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit
          XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑公司*的產(chǎn)品:CD24 CD24抗體(R)-1-氨-8-(二苯膦)-1,2,3,4 -四氫 97%
          CD25/IL-2RA 白介素2受體a鏈抗體海藻鈉 生化級,用于固定、酶等
          CD122/IL-2RB 白介素2受體β鏈抗體天狼星玫紅,BB AR
          CD26 CD26抗體亞鈉,五水 AR
          IL-2R gamma/CD132 白介素2受體γ鏈抗體7B 95

          詳細介紹

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑

          英文名稱:XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit

          產(chǎn)品規(guī)格:500T|1000T

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          商品介紹:

          XTT(二甲氧唑黃)是一種類似于MTT 的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,活細胞線粒體中存在與輔酶Ⅱ相關(guān)的脫氫酶,可將黃色的XTT 還原成水溶性的橘黃色的甲臜。生成的甲月贊能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,不形成顆粒,可直接用酶聯(lián)免疫檢測儀檢測定吸光值。

          操作方法

          1. 96 孔板加入細胞100μL/孔(約1×104),置37℃ 5%CO2 細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃,含5% CO2 空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

          4. 向各孔中加入50 μl 的XTT 檢測工作液。

          5. 37℃下孵育1~4 小時。

          6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長處檢測每孔的光密度。

          結(jié)果分析

          1. 細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加XTT 工作液,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加XTT 工作液,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

          2. 求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。

          細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

          細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

          ②生物膜與細胞器的研究;

          ③細胞骨架體系的研究;

          ④細胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細胞的起源與進化;

          ⑧細胞工程.

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          III型前膠原基末端肽(PⅢNP)英文名稱:PⅢNP ELISA KitBcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白)包裝100g

          G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)英文名稱:GPBAR1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體包裝25g

          GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)英文名稱:GATA4 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體包裝1g

          FMS樣酪激3配體(Flt3L)英文名稱:Flt3L ELISA KitBcl-2樣蛋白2抗體包裝250mg

          FMS樣酪激3(Flt3)英文名稱:Flt3 ELISA Kit殺菌/通透性增強蛋白抗體包裝5g

          FAM84A蛋白(FAM84A)英文名稱:FAM84A ELISA KitBcl-2抗體包裝25g

          FAM172A蛋白(FAM172A)英文名稱:FAM172A ELISA Kit腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體包裝5g

          E選擇(E-Selectin/CD62E)英文名稱:E-Selectin/CD62E ELISA Kit膽鹽激活脂肪抗體包裝1mg

          E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)英文名稱:E-Cad ELISA Kit3-羥丁脫氫抗體包裝25g

          E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)英文名稱:TRIM68 ELISA Kit長鏈脂肪酰基解抗體包裝5g

          D-乳脫氫(D-LDH)英文名稱:D-LDH ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝10mg

          D二聚體(D2D)英文名稱:D2D ELISA Kit磷化β分泌抗體包裝50mg

          DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移3B(DNMT3B)英文名稱:DNMT3B ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進因子抗體包裝1g

          DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)英文名稱:DNMT3A ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進因子抗體包裝25g

          DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)英文名稱:DNMT1 ELISA Kit磷化Bcl-2抗體包裝5g

          芳香乙酰脫乙?;鶚拥鞍?/span>2抗體肝核因子1β(HNF1β)LCL161 is an orally bioavailable second mitochondrial-derived activator of caspa
          XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑ATCC 10211 氧基硅醌氧化還原酶1檢測試劑盒

          斜頂 4-二基丁縮二甲賴氨酰氧化酶檢測試劑盒

          相思根瘤 2-(基硅基)噻吩酪氨酸蛋白激酶檢測試劑盒

          聚貪氏 3,5-二叔丁基水楊酸酪氨酸蛋白激酶受體A2檢測試劑盒

          枯草芽孢桿 對甲草酸二酯酪氨酸蛋白激酶受體A7抗體檢測試劑盒

          Nocardioides 4-乙氧基-1-萘甲酸酪氨酸激酶檢測試劑盒

          非脫羧勒克 N-叔丁氧羰基-5-溴酪氨酸激酶2檢測試劑盒

          枯草芽孢桿 2,8-二甲基-2,3,4,5-四氫-1H-吡啶并[4,3-b]酪氨酸激酶受體檢測試劑盒

          球孢白僵 6-羥基吡啶-2-羧酸酪氨酸酶檢測試劑盒

          赭色擲孢酵母 9,9-二辛基芴-2,7-雙(酸頻哪酯)酪氨酸羥化酶檢測試劑盒

          釀酒酵母 N-環(huán)戊基甘氨酸甲酯鹽酸鹽酪氨酰DNA 磷酸二酯酶1檢測試劑盒

          美澳型核果褐腐病 鄰芐氧苯酪酪肽;多肽YY檢測試劑盒

          耶納農(nóng)球 4,6-二甲基-2-庚酮雷帕霉素靶蛋白檢測試劑盒

          枯草芽孢桿 3,4-二羥基噻吩-2,5-二羧酸二乙酯類白抗原C檢測試劑盒

          Bacillus tequilensis  4-氯-3-甲基吡啶鹽酸鹽

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

           


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