詳細介紹
商品介紹:
用途: 血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色 注意事項: 主要由吉姆薩原液、磷酸鹽緩沖液組成,按1:9混合使用。細胞核呈紫紅色或藍紫色,胞漿呈粉紅色。 儲存條件:室溫,24個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100ml|500ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
SEA-0400英文名稱: Benzaldehyde包裝100g
TTNPB (Arotinoid Acid)英文名稱: Cavidine一種腫瘤抑制基因抗體(C端)包裝25g
Zosuquidar;LY335979英文名稱: Serotonin hydrochloride 血小板活化因子受體抗體包裝5g
阿達唑英文名稱: Evening primrose oil蛋白磷γ1抗體包裝100g
阿達帕林英文名稱: Loureirin A 核苷還原M2B抗體包裝500g
阿爾法骨化英文名稱: FRIEDELIN磷二酯4A抗體包裝100g
阿戈美拉?。?/span>II型)英文名稱: FRIEDELAN-3BETA-OL絲束蛋白T Plastin抗體包裝25g
阿戈美拉?。?/span>I型)英文名稱: (4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid神經(jīng)叢蛋白A2抗體包裝100g
英文名稱: Pyrogallol網(wǎng)蛋白抗體包裝25g
阿利多英文名稱: N-NONADECANE 前列腺腫瘤高表達蛋白1抗體包裝1g
阿利克侖-5英文名稱: N-PENTADECANE磷化腫瘤抑制基因P53抗體包裝5g
阿侖磷鈉英文名稱: ETHYL CAFFEATE嘌呤ATP受體抗體包裝1g
阿莫曲普坦蘋果鹽英文名稱: Citric acid磷化絲裂原活化蛋白激p38抗體包裝25g
阿尼西坦,回拉西坦;茴拉西坦英文名稱: Citric acid果膠抑制蛋白18抗體包裝5g
阿哌沙班英文名稱: Potassium sulfate α型-過氧化活化增生受體抗體(PPAR α, PPAR-α)包裝25g
環(huán)狀芽胞桿菌Bacillus│circulans 質(zhì)量規(guī)格:>98%肌肉骨骼受體酪激抗體試劑盒L-薄荷;L-Menthol
靈芝Ganoderma│lucidum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品肌球蛋白輕鏈激試劑盒補骨脂酚;Bakuchiol
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR肌球蛋白試劑盒補骨脂定;Psoralidin
姬姆薩染色液(Giemsa stain,1:9)糙皮側(cè)耳、平菇(可訂購) 3-氨基吡唑-4-甲酸過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1αElisa
副凝聚短狀桿 5-溴-6-羥基煙酸可溶性血管內(nèi)皮粘附分子1Elisa
產(chǎn)硫球鏈 2-氨基-5-(N,N-二甲基)磺酰ATPElisa
尖鐮孢 黃瓜專化型 4-氨基-3-甲氧基甲酯溶Elisa
黃單胞 3-芐流感病Elisa
大腸埃希 N-芐基乙二自然殺傷Elisa
樹舌 4-溴-5-硝基-2-噻吩甲尿皮質(zhì) 3Elisa
相思根瘤 硫代二乙撐雙[3-(3,5-二叔丁基-4-羥基苯基)酸酯]胰島受體Elisa
狹檐薄孔 6-氨基-2,4-二酚胰島受體底物Elisa
產(chǎn)黃纖維單胞 2-氨基-N-甲酰胰島受體底物1磷酸化Elisa
擬鬼傘 2,4,6-三苯甲酰鳥氨酸Elisa
托魯斯山鏈霉 *度酸因子Elisa
斯氏艾美耳球蟲 4-異基苯甲脂多糖結(jié)合蛋白Elisa
意外片球 2-甲基-4-甲氧基二苯青霉結(jié)合蛋白Elisa
匍匐曲霉原變種 2--5-羥基吡啶鳥氨酸脫羧Elisa