以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
XTT細菌增殖及細菌毒性檢測試劑 | XTT Bacteria Proliferation and Cytotoxicity Kit | 500T|1000T | 1~3天 |
商品介紹:
XTT(二甲氧唑黃)是一種類似于MTT 的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,活細菌線粒體中存在與輔酶Ⅱ相關的脫氫酶,可將黃色的XTT 還原成水溶性的橘黃色的甲月贊。生成的甲臜能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,不形成顆粒,可直接用酶聯免疫檢測儀檢測定吸光值。 操作方法 1. 96 孔板加入細菌100μL/孔(約1×104),置37℃ 5%CO2 細菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時。2.加入適當濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃,含5% CO2 空氣及100%濕度的細菌培養(yǎng)箱中孵育適當時間。 4. 向各孔中加入20 μl 的XTT 工作液。 5. 37℃下孵育1~4 小時。 6. 酶標儀在450nm 波長處檢測每孔的光密度。 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
DAB2互作蛋白(DAB2IP)英文名稱:DAB2IP ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝100mg
C型鈉尿肽(CNP)英文名稱:CNP ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝25mg
C肽(C-Peptide)英文名稱:C-Peptide ELISA Kit磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體包裝1g
C反應蛋白(CRP)英文名稱:CRP ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝5g
CXC趨化因子受體4(CXCR4)英文名稱:CXCR4 ELISA Kit癌易感基因相互作用蛋白1抗體包裝500g
CXC趨化因子受體3(CXCR3)英文名稱:CXCR3 ELISA Kit磷化癌易感基因相互作用蛋白1抗體包裝100g
CXC趨化因子配體16(CXCL16)英文名稱:CXCL16 ELISA Kit磷化相關死亡促進因子抗體包裝500g
CXC趨化因子13(Cxcl13/Blc/Scyb13)英文名稱:Cxcl13/Blc/Scyb13 ELISA Kit磷化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體包裝1g
CD8分子(CD8)英文名稱:CD8 ELISA Kit磷化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體包裝1g
CD4分子(CD4)英文名稱:CD4 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝1g
CD45分子(CD45)英文名稱:CD45 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝25g
CD44分子(CD44)英文名稱:CD44 ELISA Kit磷化Bcl-xL蛋白抗體包裝5g
CD3分子(CD3)英文名稱:CD3 ELISA Kit高表達神經上皮蛋白BTG3抗體包裝1g
CD34分子(CD34)英文名稱:CD34 ELISA KitB遷移基因4抗體包裝25g
CD33分子(CD33)英文名稱:CD33 ELISA KitBCL2相互作用蛋白質抗體包裝5g
血管內皮遷移蛋白抗體肝核因子1β(HNF1β)Deltarasin is a small molecular inhibitor of KRAS-PDEδ interaction with Kd of 38
XTT細菌增殖及細菌毒性檢測試劑*正紅菇 5-溴-2-甲酯類固5α還原酶2檢測試劑盒
豬丹絲 2-基吡類趨化因子受體CMLR1檢測試劑盒
密蘇里游動放線 (S)-2-甲基吡咯烷鹽酸鹽類胰蛋白酶檢測試劑盒
粉紅單端孢霉 3-(氨甲酰甲基)-5-甲基己酸冷球蛋白檢測試劑盒
釀酒酵母 N-Boc-3-甲基-4-酮冷誘導RNA結合蛋白檢測試劑盒
蠟狀芽孢桿 3-溴-4-氯吡啶鹽酸鹽利什曼原蟲抗體檢測試劑盒
根瘤 4-氟-D-苯氨酸粒集落激因子檢測試劑盒
腸沙門氏腸炎亞種 硫酸原黃素粒巨噬集落激因子檢測試劑盒
面粉增白劑速測卡 6-溴-2-氯喹啉連接蛋白-1檢測試劑盒
桔橙鏈霉 1,7-二旋氧雜[5.5]十一烷鏈激酶檢測試劑盒
Pilidium concavum 4-氟-3-甲酸甲酯亮氨酸氨肽酶檢測試劑盒
藻渣梭 4-氟-2-甲酸甲酯亮氨酸腦啡肽檢測試劑盒
煙曲霉 2-(4-甲基-1-哌)苯磷酸苷油酸脫氫酶檢測試劑盒
黑色小單孢 3,4-二芐氧基磷酸果糖激酶檢測試劑盒
莖生擬莖點霉 4-三乙氧硅基聯苯磷酸化AKT蛋白檢測試劑盒