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詳細介紹
商品介紹：
此試劑盒是用于測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數(shù)目的一種高靈敏度，無放射性的比色檢測法。實驗的靈敏度比其它如MTT, XTT 或MTS 高。由于新型細胞增殖及毒性檢測溶液相當穩(wěn)定，并且對細胞沒有毒性，可直接加入到細胞樣品中長時間孵育。 操作方法 1. 96 孔板加入細胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時。2.加入適當濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。 4. 向各孔中加入10 μl 的新型細胞增殖及毒性檢測溶液。 5. 37℃下孵育1～4 小時。 6. 酶標儀在450nm 波長處檢測每孔的光密度。 結果分析 1. 細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加新型細胞增殖及毒性檢測溶液，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加新型細胞增殖及毒性檢測溶液，無細胞），各重復孔的OD 值取均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100 2. 求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：CCK-8法細胞增殖檢測試劑盒
英文名稱：英文名稱
產(chǎn)品規(guī)格：500T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
CD30分子(CD30)英文名稱：CD30 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝1g
CD19分子(CD19)英文名稱：CD19 ELISA KitB轉錄激活因子抗體包裝250mg
CC趨化因子受體6(CCR-6)英文名稱：CCR-6 ELISA KitBCL6B抗體包裝5g
cAMP反應元件結合蛋白(CREB)英文名稱：CREB ELISA KitBAP31蛋白抗體包裝1g
Ca-ATP(Ca-ATPase)英文名稱：Ca-ATPase ELISA Kit支鏈基轉2抗體包裝1g
B因子(BF)英文名稱：BF ELISA KitBCL2相關蛋白A1抗體包裝250mg
B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)英文名稱：Bcl-2 ELISA KitB淋巴瘤蛋白3抗體包裝5g
B細胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)英文名稱：Bcl-xl ELISA Kit轉錄因子MYB相關蛋白B抗體包裝1g
B細胞活化因子(BAFF)英文名稱：BAFF ELISA Kit防御β1/Defensin β1抗體包裝25g
BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)英文名稱：Bid ELISA KitB活化因子受體抗體包裝5g
Bcl-2相關X蛋白(BAX)英文名稱：BAX ELISA KitTNF家族B激活因子抗體包裝1g
Apelin 13(AP13)英文名稱：AP13 ELISA Kit蛇巴曲抗體包裝5g
apelin 12(AP12)英文名稱：AP12 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝100g
Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)英文名稱：Col Ⅳ ELISA Kit程序性死亡配體1抗體包裝25g
Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)英文名稱：PⅢP ELISA KitB7-H4抗體包裝1g
糖還原相關蛋白質抗體促狀腺胚胎因子(TEF)MDM2 antagonist nutlin-3 is a potent inducer of apoptosis.
CCK-8法細胞增殖檢測試劑盒微小毛霉 5-溴吡啶-3-（N-乙基）甲酰磷酸化IκB激酶-α檢測試劑盒
Rhizobium multihospitium 3,4-二氯芐磷酸化N-甲基-D-天冬氨酸檢測試劑盒
Pseudomonas eucalypticola 3,5-二氯-2,4,6-三氟吡啶磷酸化α-氨基羥甲基惡唑酸檢測試劑盒
樹舌1-2 2,5-二溴對苯二甲酸二乙酯磷酸化表皮生長因子受體檢測試劑盒
短小芽孢桿 6-三氟甲基-2-氧化磷酸化肌球蛋白輕鏈檢測試劑盒
短小芽孢桿 4-氟-2-甲氧基苯酸磷酸化神經(jīng)絲H檢測試劑盒
多形環(huán)紋炭團 3-氯-2,4,5,6-四氟吡啶磷酸化外信號調(diào)節(jié)激酶檢測試劑盒
友好戈登氏 ,6-二溴-4-氟苯磷酸化外信號調(diào)節(jié)激酶檢測試劑盒
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粗糙脈孢 6-乙酸基-7-甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮磷酸化信號傳導子及轉錄激活子3檢測試劑盒
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