詳細(xì)介紹
商品介紹:
用途: 電解脫鈣液 儲存條件:室溫,12個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:電解脫鈣液(甲酸法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
華北大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amfenac Sodium腫瘤抑制基因LPP2抗體包裝5g
華佩蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 8DM腫瘤抑制基因LATS1抗體包裝1g
化橘紅(柚)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Meprednisone磷化單絲蛋白激1/2抗體包裝5g
槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Meprednisone磷化腫瘤抑制基因LATS1抗體包裝1g
槐耳菌質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Apremilast;CC-10004磷化絲/蘇蛋白激抗體包裝5g
槐果堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-(-)-Glucose磷化絲/蘇蛋白激抗體包裝1g
槐花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Keto-dehydroepiandrosterone磷化絲/蘇蛋白激抗體包裝25g
槐黃英文名稱: Rubidium nitrate黃體激釋放激類似物抗體包裝5g
槐角(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CHIR-99021 (CT99021) HCl磷化核纖層蛋白A/C抗體包裝1g
槐角苷;槐屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Harmaline;Dihydroharmine磷化淋巴特異性蛋白酪激抗體包裝25g
槐米(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acadesine膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體包裝5g
獾油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Taraxerol磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體包裝100g
環(huán)黃芪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prucalopride Succinate磷化膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體包裝25g
環(huán)杷明;環(huán)巴;去氧芥芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Naloxone HCl dihydrate腦瘤相關(guān)基因抗體包裝5g
環(huán)氧澤瀉烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Butoconazole nitrate大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體包裝100g
微桿菌Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR抗髓磷脂抗體IgA試劑盒藁本內(nèi)酯;Ligustilide
草色色串孢Torula│herbarum (Pers.) Link 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品抗蘇?;鵷RNA合成,線粒體試劑盒甘草苷;Liquiritin
: NBRC102493=IAM15022=ATCC35512=CIP106514=DSM2944=JCM21485=KACC12253=BCRC14341=KCTC12140=NCIMB13217資源名稱: 泛養(yǎng)副球菌 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,SigmaM6383抗蘇?;鵷RNA合成,質(zhì)試劑盒葛根;Puerarin
電解脫鈣液(甲酸法)大腸埃希 二苯鹽酸鹽DNA聚合δ1Elisa
桔青霉 甲砜霉棕櫚酸酯絲氨酸脫羧Elisa
小單孢 利膽酚果膠裂解Elisa
金黃色葡萄球 5-氯-1-戊赤霉20氧化Elisa
麥根腐平臍蠕孢 5-氟-2-赤霉2氧化Elisa
粉紅鐮刀 1-氨基環(huán)戊烷甲酸赤霉3氧化Elisa
盔形畢赤酵母 3-溴-5-硝苯赤霉20氧化Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 O-甲基-異脲半硫酸鹽赤霉2氧化Elisa
單格孢屬 賴氨酸醋酸鹽赤霉3氧化Elisa
放射形根瘤 3,4-二甲氧基-3-環(huán)-1,2-二酮Mg-ATPElisa
炭疽芽胞桿 3-氨基-亮氨酸氨基肽Elisa
短芽孢桿 4-氯三氯甲苯硝酸鹽還原Elisa
小孢根霉寡孢變種 5-氯-2-硝基吡啶尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移Elisa
谷氨酸棒桿Ⅰ型 戊二酸單乙酯酰氯絲氨酸;蘇氨酸蛋白激4Elisa
反卷毛殼 (6-氯-2-吡啶基)肼肽基脯氨酰順反異構(gòu)Elisa