詳細(xì)介紹
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100ml|500ml | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 細(xì)胞學(xué)樣本常規(guī)染色,尤其適用于婦科細(xì)胞學(xué)涂片染色、細(xì)胞脫落標(biāo)本染色。 注意事項: 巴氏染色液的一種主要成分,主要由亮綠、磷鎢酸等組成。OG6與EA36聯(lián)合使用,可以將細(xì)胞漿染成鮮明的綠色、藍(lán)色、粉色。 儲存條件:室溫,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
土荊皮乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2'-Deoxyguanosine monohydrate透明質(zhì)合成3抗體包裝250mg
土壟大白蟻巢(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白56抗體包裝1g
土木香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體包裝5g
土木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2'-Deoxyadenosine monohydrate熱休克蛋白相關(guān)蛋白4抗體包裝100g
土牛膝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DNA, Fishsperm透明質(zhì)合成2抗體包裝25g
兔耳草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DNA from salmon sperm 同源盒基因HOXA3蛋白抗體包裝5g
菟絲子(南方菟絲)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-Fluoro-2'-deoxycytidine同源盒基因HOXA4蛋白抗體包裝1g
蛻皮激(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-Fluoro-2'--deoxyuridine同源盒基因HOXA6蛋白抗體包裝25g
脫落(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Guanosine同源盒基因HOXA7蛋白抗體包裝5g
脫氫齒孔英文名稱: Guanosine羥基類固(17β)脫氫4/17β-HSD4抗體包裝1g
脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: GDP Disodium Salt血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體包裝100g
脫穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SU-11274血紅結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
脫穿心蓮內(nèi)酯琥珀半酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Uridine血紅蛋白α抗體包裝500g
脫羊藿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Uridine結(jié)合球蛋白β抗體包裝100g
脫氧熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: UTP, Trisodium Salt海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體包裝25g
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白重鏈可變區(qū)試劑盒遼東楤木皂苷Ⅹ;Araloside X
三隔鐮刀菌Gibberella│tricincta El-Gholl McRitchie Schoult. & Ridings 質(zhì)量規(guī)格:>99%免疫球蛋白重鏈試劑盒硫辛;Lipoic acid
鏈孢囊菌Streptosporangium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白輕鏈lambda試劑盒羅丹明B;Rhodamine B
EA36染色液德爾布有孢酵母 2,5-二氟腸激Elisa
葡萄座腔 對甲苯異硫酸酯氧化低密度脂蛋白-β2 GPⅠElisa
乳酸乳球乳亞種 4-硫脲αL艾杜糖苷酸Elisa
根瘤 2,5-二氯-2,5-二甲基己烷膜聯(lián)蛋白-A5Elisa
鏈霉 4-(叔丁氧基羰基)苯酸庚型肝炎病IgM抗體Elisa
灰肉鏈霉 N,N'-二苯甲脒α-胡蘿卜Elisa
廢鹽田枝芽孢桿 2-氯-1,4-苯二硫酸鹽γ-酚Elisa
紅平菇(農(nóng)) 4-異基磺?;剿幡?酚Elisa
肺炎克雷伯氏肺炎亞種 2,2-二乙氧基乙纖溶Elisa
煙薰鏈霉 氯乙縮二乙N-乙酰神經(jīng)氨酸Elisa
葡萄酒有孢漢遜酵母 4-溴吡啶-2-甲末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移Elisa
斑玉蕈 3-氨基苯酸鹽酸鹽腺苷酸激Elisa
溜曲霉 5-乙?;蜞奏ぱ芤种?Elisa
厚垣鐮孢 苯磺酸異酯后期表達(dá)增強T-活化抗原Elisa
灰紅鏈霉 2,3-二氯硫代苯甲酰葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白10Elisa