商品介紹:
Balicatib(AAE-581)是組織蛋白酶K抑制劑,比對組織蛋白酶B,L和S的抑制性高10到100倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:354813-19-7 別名:AAE581 純度:97.23% 分子量:411.54 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
暗黃紫色小單孢菌磷化CD244抗體Human EM-IgG(Endometrium-Immunoglobulin G) ELISA Kit人胰抑制(Pancreastatin)免疫試劑盒
Pseudomonas神經(jīng)元電壓門控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗體Human A16-IgM(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin M) ELISA Kit人胰腺癌標(biāo)志物CA242 免疫試劑盒
總狀毛霉原變型3號染色體開放閱讀框25抗體Human EV71-IgM(Enterovirus 71-Immunoglobulin M) ELISA Kit人胰高血糖樣肽2受體(GLP2R)免疫試劑盒
釀酒酵母轉(zhuǎn)錄激活因子MYB抗體Human HCG-IgG(Human chorionic gonadotropin-Immunoglobulin G) ELISA Kit人胰高血糖樣肽2(GLP2)免疫試劑盒
釀酒酵母陽離子通道相關(guān)蛋白1抗體Human HP-IgG(Helicobcter Pylori-Immunoglobulin G) ELISA Kit人胰高血糖樣肽1受體(GLP1R)免疫試劑盒
巴西固氮螺菌1號染色體開放閱讀框222抗體Human EM-IgG(Endometrium-Immunoglobulin G) ELISA Kit人胰高血糖樣肽1(GLP-1)免疫試劑盒
咖啡擬盤多毛孢2號染色體開放閱讀框15抗體Human HCG-IgG(Human chorionic gonadotropin-Immunoglobulin G) ELISA Kit人胰高血糖(GC)免疫試劑盒
少疣曲霉骨架相關(guān)蛋白4抗體Human A16-IgM(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin M) ELISA Kit人胰多肽(PP)免疫試劑盒
冷溫木拉克酵母肌肽二肽1抗體Human Mammaglobin B ELISA Kit人胰淀(Amylin)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌性線粒體肌激抗體Human PST(Pancreastatin) ELISA Kit人胰淀粉(PAMY)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌碳酐相關(guān)蛋白8抗體Human AXA1(apRataxin) ELISA Kit人胰島抗原2抗體/蛋白酪磷抗體(IA-2A)免疫試劑盒
戊糖片球菌鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體Human SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) ELISA Kit人胰島抗體(ICA)免疫試劑盒
水單胞菌原癌基因CD39樣蛋白4抗體Human SAT1(Diamine acetyltransferase 1) ELISA Kit人胰島自身抗體(IAA)免疫試劑盒
鏈格孢膠原樣蛋白抗體Human IFNA2(Inteferon alpha 2a) ELISA Kit人胰島原(PI)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌腫瘤易感性候選基因5抗體Human SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) ELISA Kit人胰島樣因子3(INSL3)免疫試劑盒
香蕉鈣調(diào)蛋白激激β抗體Human beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7/MAC25/PSF)免疫試劑盒
擬多形布勒酵母Bullera│pseudovariabilis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRH5型病試劑盒基黃連堿
: =JCM13038=KCCM42117資源名稱: 海沈氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRG蛋白偶聯(lián)受體152試劑盒劍麻皂苷元
: F111資源名稱: 小克銀漢霉 質(zhì)量規(guī)格:> 95%,BRG蛋白偶聯(lián)受體109A試劑盒2-金剛烷
組織蛋白酶K抑制劑(Balicatib)(R)-(-)-布洛芬 (S)-(+)-賴英文名稱: 3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone磷化p21激活激1抗體包裝5g
(R)-4-羥基鹽心得安英文名稱: 3,5-Dihydroxybenzamide磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體包裝1g
(R)-5-羥基托特羅定英文名稱: 3,5-Dibenzyloxybenzaldehyde磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體包裝5g
(R)-7-乙基喜樹堿英文名稱: Hexaphenylbenzene磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體包裝25g
(R)-9-(2-羥基)腺嘌呤英文名稱: 1,3,5-Tris(4-carboxyphenyl)benzene磷化磷酯Cγ1抗體包裝5g
(R)-9-[2-基氧基)-N6-酰腺嘌呤英文名稱: 1,3,5-Tris(bromomethyl)benzene磷化磷酯Cγ2抗體包裝1g
(R)-N-去乙基奧昔布寧鹽鹽英文名稱: Naphthacene磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝250mg
(R)-O,O-二(叔丁基二硅烷基)去氧腎上腺英文名稱: Naphthacene (purified by sublimation)磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝1g
(R)-O-去基萘普生英文名稱: Pentacene (purified by sublimation)磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝5g
(R)-地平英文名稱: Pigment Blue 15 (purified by sublimation)磷化蛋白激C β1/β2(Thr500)抗體包裝1g
(R)-奧美拉唑鈉鹽英文名稱: Phthalocyanine (purified by sublimation)孕受體膜相關(guān)元件抗體包裝5g
(R)-奧昔布寧化物英文名稱: Picene (purified by sublimation)磷化P63腫瘤抑制基因抗體包裝100g
(R)-比卡魯英文名稱: 5,6,11,12-Tetraphenylnaphthacene (purified by sublimation)磷化P63腫瘤抑制基因抗體包裝25g
(R)-比卡魯 (1S)-樟腦酯英文名稱: 1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-Hexadecafluorophthalocyanine Copper(II) (purified by sublimation)蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移1抗體包裝5g
(R)-布洛芬英文名稱: 3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Dianhydride磷化嗜中性粒胞漿因子4抗體包裝1g