產(chǎn)品屬性:
中文名稱:cPLA2α抑制劑(CAY10650)
英文名稱:CAY10650
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
CAY10650是cPLA2α抑制劑,IC50為12nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1233706-88-1 純度:98.0% 分子量:471.5 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蒂蓋姆頭珠霉肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號(hào)染色體)抗體Human IFIT2 ELISA Kit小鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體(TPO-Ab)免疫試劑盒
相思根瘤菌三磷腺檸檬裂解抗體Human ICA1L ELISA Kit小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)免疫試劑盒
那波鏈霉菌β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體Human ICAM2(Intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit小鼠抗環(huán)胍肽抗體(Anti-CCP-antibody)免疫試劑盒
谷棒桿菌內(nèi)收蛋白a1抗體Human ICT1 ELISA Kit小鼠抗核小體抗體(IgG)免疫試劑盒
平菇α2纖溶色上皮衍生因子抗體Human IFT81 ELISA Kit小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)免疫試劑盒
羅爾細(xì)薄菌膜粘連蛋白7抗體Human ICK ELISA Kit小鼠抗核抗體IgG 免疫試劑盒
根腐平臍蠕孢早老γ分泌抗體Human IFT80 ELISA Kit小鼠抗弓形蟲抗體(IgG)免疫試劑盒
布氏乳桿菌鈉ATP蛋白a1抗體Human IFIT3 ELISA Kit小鼠抗弓形蟲IgM抗體免疫試劑盒
psilent-dual1(pSD1)Rho鳥苷交換因子2抗體Human IFT88 ELISA Kit小鼠抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒
哈氏弧菌磷化Rho鳥苷交換因子2抗體Human IFITM2(Interferon-induced transmembrane protein 2) ELISA Kit小鼠抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)*去整合樣金屬蛋白9抗體Human IFIT5 ELISA Kit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫試劑盒
產(chǎn)色葡萄球菌艾滋病病制約錨定蛋白抗體Human IFITM1(Interferon-induced transmembrane protein 1) ELISA Kit小鼠抗Smith抗體(Sm)免疫試劑盒
變異鹽單胞菌腺苷環(huán)化1抗體Human IFNA6 ELISA Kit小鼠抗IVIgG抗體免疫試劑盒
裂褶菌核糖核L抑制蛋白抗體Human IFRD1 ELISA Kit小鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒
沙壤土桿菌Rho GTP激活蛋白24抗體Human IFRD2 ELISA Kit小鼠卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)免疫試劑盒
東方伊薩酵母GTP激活蛋白ASAP3抗體Human IFI30 ELISA Kit小鼠巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)免疫試劑盒
泊庫(kù)島食烷菌Alcanivorax│borkumensis 質(zhì)量規(guī)格:BR白介18結(jié)合蛋白試劑盒商陸皂苷乙
鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介18試劑盒絲石竹皂苷元3-O-B-D葡萄糖酯
廈門海旋菌Thalassospira│xiamenensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介17F試劑盒松香
cPLA2α抑制劑(CAY10650)山綠茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Swertiajaponin錯(cuò)配修復(fù)蛋白2抗體包裝5g
山麥冬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Taurocholic acid Sodium Salt5基胞嘧啶抗體包裝1g
山麥冬皂苷B英文名稱: Taurocholic acid Sodium SaltT分化蛋白MAL2抗體包裝25g
山麥冬皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nomilin環(huán)指蛋白61抗體包裝5g
山麥冬皂苷J英文名稱: Levistilide A蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗體包裝1g
酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imperatorin錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體包裝250mg
酚-3-O-β-D-槐糖苷;酚-3-O-槐糖苷英文名稱: α-pinene血管緊張Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體包裝5g
酚-4’-O-葡萄糖苷;酚-4’-O-β-D-...英文名稱: β-pinene巨噬清道夫受體抗體包裝1g
酚-7-O-葡萄糖苷英文名稱: Gypenoside XVII生肌調(diào)節(jié)因子6抗體包裝500mg
苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium Aescinate基化CpG結(jié)合蛋白抗體包裝5g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fisetin單克抗體包裝1g
山柰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fisetin單克抗體包裝5g
山柰酚-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷英文名稱: KirenolGTP結(jié)合蛋白MAS1抗體包裝100ml
山柰酚-3-O-槐二糖-7-O-葡萄糖苷英文名稱: Oroxylin A髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體包裝25ml
山柰酚-3-O-龍膽二糖苷英文名稱: 5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol黑色瘤相關(guān)抗原抗體包裝100g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)