Kovac試劑公司*的產(chǎn)品：KLRF1/NKp80/FITC 熒光標(biāo)記性受體NK-p80抗體IgG偏硅鈉，五水 95%
K-ras/FITC 熒光標(biāo)記原癌因K-ras抗體IgG零水偏硅鈉 SiO2, 44-47%
KT3 tag/FITC 熒光標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽抗體IgG偏硅鈉，九水 AR
KT3 tag/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽抗體IgG偏硅鈉，九水 CP

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Kovac試劑

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100ml|500ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

2,2'-聯(lián)四唑-1,1'-二基(洛沙坦雜質(zhì))英文名稱： 1-BromopyreneT淋巴凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體包裝500g

2,2-二基-4-異基-1,3-并二茂英文名稱： 4-Bromopyrene蛋白調(diào)解因子9抗體包裝25g

2,3,4-三-O-酰-泊酚-β-D-葡萄糖苷...英文名稱： 1,6-Diaminopyrene胰腺激抗體包裝5g

2,3-去亞異基托吡酯英文名稱： 1,3-Diaminopyrene纖溶相關(guān)蛋白B2抗體包裝1g

2,3-脫氫鈉鹽英文名稱： 2,7-Di-tert-butylpyrene多聚合α/β/γ抗體包裝5g

2,4-二(三基硅烷基)-5-尿嘧啶英文名稱： 1-Nitropyrene含脯突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體包裝1g

2,4-二基-6-基-7-蝶啶英文名稱： 4-Nitropyrene外周蛋白2抗體包裝5g

2-(R)-[1-(R)-(3,5-二(三基)基...英文名稱： 2-Aminofluorene區(qū)帶蛋白PZP抗體包裝100mg

2-[(2,6-二)基]英文名稱： 2-Amino-9-fluorenone蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1β（FTβ）抗體包裝1g

2-（巰基）腺苷 5'-三磷四鈉鹽合物英文名稱： 2-Amino-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白15抗體包裝250mg

2-基-5,6-二-3(4H)-喹唑啉醋(阿那格...英文名稱： 9-Bromofluorene原鈣粘蛋白β2抗體包裝1g

2-基-6,8-二羥基嘌呤鹽鹽英文名稱： 2-Bromofluorene原鈣粘蛋白β4抗體包裝25g

2-基-6-羥基-8-巰基嘌呤英文名稱： 2-Bromo-9-fluorenone原鈣粘蛋白γ10抗體包裝5g

2-基-6-巰基嘌呤-9-D-核苷合物英文名稱： 2-Bromo-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白γA4抗體包裝1g

2-基腺苷英文名稱： 2,7-Diaminofluorene原鈣粘蛋白γA2抗體包裝25g

乳酪棒桿菌Corynebacterium│casei 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷脫羧65試劑盒木糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

總狀毛霉Mucor│racemosus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷脫羧試劑盒果糖成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷受體試劑盒糖精鈉;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
Kovac試劑短桿狀馬賽 1,3,5-三(4-溴苯基)苯膜結(jié)合型前列腺E合成1Elisa

西奈青霉 4-(三氟甲基)環(huán)己酮磷酸化P38蛋白Elisa

抗輻射鏈霉 順式環(huán)己-1,2-二甲酰亞磷酸化c-jun氨基末端蛋白激Elisa

哈茨木霉 4-羥基-2,6-二甲酸RNA聚合轉(zhuǎn)錄終止因子ⅠElisa

松鼠葡萄球松鼠亞種 2-溴肉桂酸維甲酸Elisa

紅色紅曲霉 3--2-甲酸Ca-Mg-ATPElisa

根瘤 4--2-甲酸黃體生成受體Elisa

大豆慢生根瘤 2-萘乙白介17DElisa

黑腐皮殼 L-精氨酸硝酸鹽基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白Elisa

中華根瘤 6--5-氮雜Ⅰ型膠原C端肽β特殊序列Elisa

解淀粉芽孢桿解淀粉亞種 三(三氟磺酸)鋁鈣調(diào)Elisa

竹喙球 2--1,1,1-氧基乙烷α酮戊二酸Elisa

猴頭菇 8-溴甲基喹啉雌酮Elisa

鏈格孢 3-甲三鹽脫氫表雄酮硫酸酯Elisa

釀酒酵母 丁酰乳酸丁酯聚(ADP核糖)聚合1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)