產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | GOY-01X10000 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 |
Phospho-c-Fos (Thr232) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化c-fos抗體IgG4-羥苯 97%
Phospho-c-Fos (Thr325) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2022-04-24 10:18:19瀏覽次數(shù):216
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
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貨號(hào) | GOY-01X10000 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 |
商品介紹:
用途: 培養(yǎng)細(xì)胞和組織切片的衰老檢測(cè),又稱(chēng)X-gal染色液 注意事項(xiàng): 試劑盒主要由β-半乳糖苷酶固定液、X-gal、半乳糖苷酶染色液等組成。以X-Gal為底物,在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會(huì)生成深藍(lán)色產(chǎn)物。 儲(chǔ)存條件:-20℃,避光,12個(gè)月 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100T | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
磺雙氫麥角堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 21-Acetoxypregnenolone相似腫瘤抑制基因HUGL抗體包裝1g
基多巴(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): phelloptorin白介1β抗體包裝25g
基黃連堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ellagic acidβ-乳球蛋白抗體包裝5g
基蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Tetrahydropalmatine脂質(zhì)磷磷相關(guān)蛋白1/可塑性相關(guān)基因3抗體包裝100g
基麥冬二氫高異黃A,基麥冬黃烷A英文名稱(chēng): 4-Bromobenzylamine神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體包裝25g
基麥冬黃A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ganoderenic acid B富含亮重復(fù)家庭蛋白1抗體包裝500g
基麥冬黃烷B英文名稱(chēng): Tetrahydropalmatine富含亮重復(fù)家庭蛋白4抗體包裝1g
溴東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tetrahydropalmatine瘦受體抗體(長(zhǎng))包裝5g
假人參皂苷RT1英文名稱(chēng): Pregnenolone Acetate白血病抑制因子抗體包裝1g
見(jiàn)血飛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pregnenolone AcetateNogo受體反應(yīng)蛋白抗體包裝25g
劍麻皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Chitosan凋亡抑制蛋白抗體包裝5g
箭根薯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Chitosan層粘連蛋白抗體包裝100g
江南卷柏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): AllicinLpin1 抗體包裝25g
江藤苷英文名稱(chēng): α-CyperoneLpin1 抗體包裝5g
姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cefaclor溶菌抗體包裝1g
暗棕色桿菌Phaeobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99%抗軟骨抗體試劑盒肥皂草;Saponin
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%抗?fàn)盍霾?7型試劑盒法卡林二;Falcarindiol
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗絨毛膜促性腺激抗體試劑盒蜂斗菜內(nèi)酯A;Bakkenolide A
β-半乳糖苷酶染色試劑盒(細(xì)胞專(zhuān)用)黑木耳 4'-氟苯酮二乙烯原葉綠酸酯Elisa
黑曲霉 3,4-二氟油菜類(lèi)固Elisa
地下節(jié)桿 間氟木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)水解Elisa
解淀粉芽孢桿 3-溴-4-氯三氟甲苯維生KElisa
枯草芽孢桿 1-異基咪唑Flag標(biāo)簽Elisa
3-氟-4-甲苯異分支酸合Elisa
小鏈霉 2,4-二氟甲苯異分支酸裂解Elisa
繩生毛殼 2-氟-4-氯甲苯葉綠降解過(guò)氧化物Elisa
釀酒酵母 2-氯-4-氟甲苯脂肪酸分解Elisa
黑木耳(186) 4-氟-2-酚甲基轉(zhuǎn)移1Elisa
巨大芽孢桿 4-氟-3-酚磷脂酸磷酸酯Elisa
Candida 2,5-二氟甲苯羥化Elisa
變平滑假絲酵母 2-溴-5-氟甲苯異分支酸合成Elisa
柴油食烷 4-(4-甲氧基苯基)丁酸異分支酸裂解Elisa
Enterobacter cowanii Inoue et al. 2,3-二氟絲氨酸蛋白抑制劑Elisa