商品介紹:
Etoricoxib(MK-0663)能選擇性抑制COX-2,IC50為1.1μM(LPS誘導(dǎo)的前列腺素E2合成實(shí)驗(yàn)),而對(duì)COX-1的IC50則為116μM(凝血后血清血栓素B2生成實(shí)驗(yàn))。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):202409-33-4 別名:MK-663;MK-0663 純度:99.92% 分子量:358.84 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:COX-2抑制劑(Etoricoxib)
英文名稱:Etoricoxib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Arthrobacterβ淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體Human HSPB7 ELISA Kit小鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫試劑盒
總狀毛霉錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體Human HSD17B6 ELISA Kit小鼠甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
新月彎孢二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移3抗體Human HSD17B7 ELISA Kit小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒
根瘤菌二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移5抗體Human HSD17B8 ELISA Kit小鼠甲基化(Methylase)免疫試劑盒
俏紅芝腺苷單磷脫1抗體Human HSD3B2 ELISA Kit小鼠己糖激(HK)免疫試劑盒
德沃斯氏菌屬紅蛋白Ank1抗體Human HPS6 ELISA Kit小鼠低密度脂蛋白受體(VLDLR)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌腺苷琥珀裂解抗體Human HPSE2 ELISA Kit小鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌α1B糖蛋白抗體Human HRASLS5 ELISA Kit小鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒
菜豆間座殼載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體Human HOXD4 ELISA Kit小鼠基質(zhì)衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)免疫試劑盒
油脂酵母凋亡誘導(dǎo)因子3抗體Human HRC ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)免疫試劑盒
平菇凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體Human HRH2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒
米曲霉凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體Human HP1BP3 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒
瓶形毛殼性神經(jīng)鞘磷脂抗體Human HOXD8 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
加米那類芽孢桿菌腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human HRP 2(Hepatoma-derived growth factor-related protein 2) ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒
南鼠尾桿菌肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體Human HRPT2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)免疫試劑盒
間型彎孢ATPH+轉(zhuǎn)運(yùn)溶體輔助蛋白2抗體Human HSDL2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒
腐皮鐮孢Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR白介-12受體試劑盒石蒜裂堿
豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)白介12試劑盒四氫非洲防己堿
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:AR白介12試劑盒石松靈堿
COX-2抑制劑(Etoricoxib)升麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Panaxadiol肌收縮蛋白MYOT抗體包裝25g
升麻苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Panaxatriol磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體包裝5g
升麻-3-O-α-L-拉伯糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Compound K環(huán)指蛋白59抗體包裝25g
生脈提取物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside F1磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體包裝5g
勝紅薊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside F2羥戊激抗體包裝5g
圣草次苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rb1羥戊脫羧抗體包裝1g
圣草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rb2胞漿蘋果1抗體包裝5g
蓍草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rb3組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體包裝1g
十七碳酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rc微絲相關(guān)蛋白3樣抗體包裝250mg
石菖蒲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rd微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白包裝100g
石吊蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gliquidone單酰甘油脂肪抗體包裝25g
石吊蘭英文名稱: Gliquidone致癌基因n-Myc抗體包裝25g
石斛酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rf多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
石斛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rg1線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體包裝1g
石見穿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 20(R)Ginsenoside Rg2蛋白激MST2抗體包裝25g