商品介紹:
用途: 堿性磷酸酶染色與過雪夫試劑合用,同時顯色堿性磷酸酶和PAS陽性物質(zhì)。 注意事項: 適用于冰凍切片、石蠟切片,堿性磷酸酶活性部位呈黑色,PAS陽性物質(zhì)呈紫紅色。染色過程中注意控制過處理的時間,否則容易褪色。 儲存條件:4℃,避光,6個月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:堿性磷酸酶-PAS聯(lián)合染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:6×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
雷公藤乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Humic acid單絲蛋白激1抗體包裝25g
類葉升麻苷,毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Usaramine低分子量蛋白體7抗體包裝5g
藜蘆英文名稱: L-Aspartic acid sodium salt促黃體生成抗體包裝1g
里卡靈A英文名稱: Taxifolin層粘蛋白α1抗體包裝250mg
利卡靈-B;利卡靈B英文名稱: TaxifolinLETM1蛋白抗體包裝1g
利血平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aloeemodin乳脫氫抗體包裝250mg
櫟櫻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aloeemodin磷化絲/蘇蛋白激抗體包裝5g
連錢草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytochrome C層粘連蛋白β1抗體包裝100g
連翹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytochrome C鼻咽癌癌基因抗體包裝25g
連翹苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cytochrome C白血病抑制因子受體抗體包裝500g
連翹酯苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Berberine hydrochloride核纖層蛋白A抗體包裝5g
連翹酯苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Berberine hydrochloride核纖層蛋白B抗體(核膜標(biāo)志物)包裝1g
連翹酯苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Geniposidic acid核纖層蛋白A/C抗體包裝25g
蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Geniposidic acidLRIG2抗體包裝5g
蓮心堿高鹽英文名稱: 3,4-Dihydroxybenzoic acid淋巴增強(qiáng)因子-1抗體包裝1g
: ivcas7.00959資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:BS 抗卵巢抗體試劑盒二氫草莓;2-Methylvaleri
: DSM6674=ATCC35659資源名稱: 奇異變形桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%抗流行性出血熱病抗體IgM試劑盒β,β-二基烯酰紫草;β,β-Di
: HBUM171143資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:用于熒光標(biāo)記抗流行性出血熱病抗體試劑盒二氫石蒜堿;Dihydrolycorin
堿性磷酸酶-PAS聯(lián)合染色液異常畢赤酵母 2-巰基-5-氯苯并噻唑山梨脫氫Elisa
枯草芽孢桿 4-氨基-2-溴苯鹽還原Elisa
蠟狀芽孢桿 4-氨基-2-氟苯腺苷酸環(huán)化1Elisa
芽胞桿 O-甲基異脲鹽酸鹽乙酰羧化1Elisa
噬幾丁質(zhì)屬 2-氨基-5-木質(zhì)合成Elisa
湖泊黃桿 2,6-二溴對氯咖啡酸-O-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
側(cè)孢短小芽胞桿 2,7-二氯芴-4-環(huán)氧乙烷尼克酰Elisa
少根根霉 4-氯苯甲酰乙酸甲酯芳樟合成Elisa
擬土黃紅菇 2-甲氧基-4-香葉合成Elisa
十字斯氏格孢 2-溴-5-氨肽Elisa
美澳型核果褐腐病 2-甲氧基-6-25-羥膽鈣化Elisa
蓖麻炭疽盤孢 6-甲氧基異喹啉線粒體異檸檬酸脫氫Elisa
漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇) 烯氧基苯硫酚色氨酸脫羧Elisa
大腸埃希 4,6-二羥基-1,3-間苯二甲酸甲酯羥基-O-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
小環(huán)綿盤 2-氨基-5-溴煙酸5-羥色-N-乙酰轉(zhuǎn)移Elisa