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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：0.1M 硼酸緩沖液，pH8.4
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100ml
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
本產(chǎn)品為0.1M 的硼酸緩沖液?？蓱?yīng)用于BrdU 增殖檢測(cè)酸處理的中和等實(shí)驗(yàn)。本品含有100mM 的硼酸、75mM NaCl，25mM 的四硼酸鈉，pH 為8.4。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
組蛋白H2A(H2A)英文名稱：H2A ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體包裝5g
組胺H4受體(HRH4)英文名稱：HRH4 ELISA Kit炭疽桿菌致死因子LF抗體包裝10mg
組豐富糖蛋白(HRG)英文名稱：HRG ELISA Kit蛋白BOC抗體包裝250mg
阻抑(PHB)英文名稱：PHB ELISA Kit肽A抗體包裝1g
足盂蛋白(PCX)英文名稱：PCX ELISA Kit腦鈉/利鈉肽抗體包裝5g
棕櫚酰化膜蛋白6(MPP6)英文名稱：MPP6 ELISA KitBcl2 beta蛋白抗體包裝1g
自身免疫調(diào)節(jié)因子(AIRE)英文名稱：AIRE ELISA Kit骨涎蛋白抗體包裝25g
轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)英文名稱：TNPO1 ELISA Kit死亡調(diào)解子抗體包裝5g
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)英文名稱：TFR2 ELISA KitApollon凋亡抑制蛋白抗體包裝1ml
轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)英文名稱：TRF ELISA Kit表面趨化因子受體6抗體包裝5ml
轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)英文名稱：TCF20 ELISA Kitβ-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體包裝1g
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)英文名稱：ATF6 ELISA Kit骨成型蛋白受體1A抗體包裝25g
轉(zhuǎn)錄激活因子5(ATF5)英文名稱：ATF5 ELISA KitBcl-xL蛋白抗體包裝5g
轉(zhuǎn)錄激活因子3(ATF3)英文名稱：ATF3 ELISA Kit磷化Bcl-xL(Ser62)抗體包裝100ml
轉(zhuǎn)狀腺蛋白(TTR)英文名稱：TTR ELISA Kit相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體包裝500ml
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)N/A
0.1M 硼酸緩沖液，pH8.4粉紅單端孢 二叔丁基疊氮草酸趨化素樣因子1檢測(cè)試劑盒
大腸埃希氏 2-乙趨化樣因子受體1檢測(cè)試劑盒
狂犬病病 3-芐氧基苯趨化因子CCL4樣蛋白1檢測(cè)試劑盒
黑曲霉 1-(2-苯并呋喃基)乙酮趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1檢測(cè)試劑盒
雙孢蘑菇 環(huán)吡酮雜質(zhì)B趨化因子配體17檢測(cè)試劑盒
靈芝(紅芝, 赤芝) 1-芘酸趨化因子配體21檢測(cè)試劑盒
佛羅里達(dá)側(cè)耳 6-氟-1-茚酮趨化因子配體5檢測(cè)試劑盒
玫煙色棒束孢 3-(2-)酸去甲腎上腺素檢測(cè)試劑盒
香菇 2-氟-3-硝基吡啶去唾液酸糖蛋白受體檢測(cè)試劑盒
網(wǎng)紋馬勃 二甲基硫氨甲酰氯全段甲狀旁腺素檢測(cè)試劑盒
劉氏屬 二硫化甲脒固酮檢測(cè)試劑盒
微白黃鏈霉 3-基噻吩脫氫酶1家族成員A1檢測(cè)試劑盒
碗狀瘤杯 5-氯-2-氟吡啶犬尿氨酸檢測(cè)試劑盒
大腸埃希 苯并-1,4-二氧六環(huán)-6-酸炔雌檢測(cè)試劑盒
無 4-溴-2,6-二甲缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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