詳細介紹
商品介紹:
用途: 用于真菌(曲菌和白色念珠菌)和卡氏肺囊蟲類生物的染色 注意事項: 固定,石蠟包埋。真菌、肺囊蟲、黑色素染為棕黑色或黑色。 儲存條件:4℃,避光,6個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
6×50ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
黑曲霉APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體Human LRCH1 ELISA Kit豬巨噬遷移抑制因子(糖基化抑制因子)(MIF)免疫試劑盒
*蟲擬蠟菌甲胎蛋白單克抗體(包被)Human LPXN ELISA Kit豬金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒
瓦克青霉甲胎蛋白單克抗體(檢測)Human LRAT ELISA Kit豬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
印度不動桿菌ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體Human LIN7A ELISA Kit豬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
Bacillus 芳香烴受體抗體Human LMF2 ELISA Kit豬角化生長因子(KGF)免疫試劑盒
嗜鹽堿堿芽孢桿菌吸引抗體Human LIN28B ELISA Kit豬降鈣原(PCT)免疫試劑盒
球孢白僵菌腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體Human LITAF ELISA Kit豬降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
柔嫩艾美耳球蟲蛋白激B2Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒
平菇血管生成2抗體Human Liprin alpha 1 ELISA Kit豬甲狀腺(T4)免疫試劑盒
金針菇芳香化/色P450/雌激合成抗體Human LIV-1 ELISA Kit豬低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
釀酒酵母腺苷A2A受體抗體Human LIN28B ELISA Kit豬激敏感性脂肪(HSL)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌蛋白激A錨定蛋白95抗體Human LMBR1L ELISA Kit豬激動異構(gòu)/分裂MB(CKMB)免疫試劑盒
曲霉頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運體蛋白抗體Human LMF2 ELISA Kit豬基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒
*樺褐孔菌去整合樣金屬蛋白8抗體Human LIN7A ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
狀鞘單胞菌芳香乙酰脫乙?;鶚拥鞍?/span>3抗體Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)免疫試劑盒
三孢布拉氏霉ACN9蛋白抗體Human LHPP ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
榛針孢酵母Nematospora│coryli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 補體蛋白9試劑盒紫莖女貞苷A
阮繼生氏菌Ruania│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR補體蛋白5試劑盒正丁
pr1.01739資源名稱: 皮氏羅爾斯通氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC 補體蛋白4試劑盒梓酚
六胺銀染色液(改良Grocott-蘇木素法)膠孢 4-甲基-3(2H)-噠酮胰淀Elisa
球孢白僵 5-甲基-5-基-1,3-二惡烷-2-酮肝磷脂酰乙Elisa
亮白曲霉 12-溴-1-十二烷NADPH氧化2Elisa
蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 2,2-二氟維生CElisa
類干酪乳桿 芐氧羰基-D-天冬氨酸 4-叔丁酯一水物肝核因子1βElisa
黃綠鏈霉 3-羥基-4-乙酮胰多肽Elisa
金龜子綠僵 4-羥基異喹啉氧化三Elisa
新城疫病 4-吡啶甲脒Caspase-1p20Elisa
變灰青霉 6-異硫酸熒光白介1βp17Elisa
鍺栓孔 4-氨甲基11β羥類固脫氫1型Elisa
紅曲霉 乙酸對叔丁基環(huán)己酯抗雙鏈DNA抗體;天然DNA抗體Elisa
細鏈格孢 磺酸酐酯Elisa
滑假絲酵母 1-環(huán)己基3氧代5α類固4脫氫2Elisa
谷氨酸棒桿 1H-吲唑-6-羧酸乙酯胰高血糖樣肽1.7-36Elisa
異常漢遜酵母 (3-甲?;?乙酸乙酯胃促生長Elisa