紅色標(biāo)本保色液Ⅰ公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 熒光標(biāo)記化血小板源性生長因子受體-B抗體IgG草死 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Paxillin/FITC 熒光標(biāo)記樁蛋白Paxillin抗體IgG二烯草
Phospho-Paxillin (Tyr118)/FITC 熒光標(biāo)記化樁蛋白Paxillin抗體IgG1-溴-3-烷 99%
PDI/

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

中慢生華癸根瘤菌腦富含膜附著信號蛋白1抗體Human GLRA1 ELISA Kit小鼠β甘露糖苷(β Manase)免疫試劑盒

鈉線菌屬卵黃狀黃斑病蛋白3抗體Human GLRB ELISA Kit小鼠β干擾(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒

產(chǎn)短桿菌卵黃狀黃斑病蛋白抗體Human GLUD2 ELISA Kit小鼠β-防御3 免疫試劑盒

弗吉尼亞鏈霉菌卵黃狀黃斑病蛋白4抗體Human Glutamate receptor 2 ELISA Kit小鼠β-防御1 免疫試劑盒

pLKO.1-puro炭疽桿菌菌體蛋白抗體Human GLYATL1 ELISA Kit小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)免疫試劑盒

生金色鏈霉菌EBV立即早期基因BRLF1抗體Human GLYCTK ELISA Kit小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒

紅色鹽場粒狀古菌腦表達(dá)X連鎖蛋白4抗體Human GLYR1(Glyoxylate reductase 1 homolog) ELISA Kit小鼠β半乳糖苷(βGAL)免疫試劑盒

釀酒酵母B淋巴新型蛋白1抗體Human GM2A ELISA Kit小鼠β基己糖苷A(β-Hex A)免疫試劑盒

巴氏醋桿菌核突觸蛋白β抗體Human GLYAT ELISA Kit小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫試劑盒

木拉克酵母屬BTRC2蛋白抗體Human GMCL1 ELISA Kit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)免疫試劑盒

生香毛霉BEND3蛋白抗體Human GMDS ELISA Kit小鼠β1腎上腺能受體(β1AR)抗體免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌BEND4蛋白抗體Human GLIPR1L1 ELISA Kit小鼠α羥基丁脫氫(αHBDH)免疫試劑盒

耐輻射奇球菌BEND6蛋白抗體Human GIMAP7 ELISA Kit小鼠α葡萄糖苷(α-glucosidase)免疫試劑盒

路德類酵母胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體Human GINS3 ELISA Kit小鼠α-黑色激(α-MSH)免疫試劑盒

鯊魚盧金星菌巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白2抗體Human GLIS1 ELISA Kit小鼠αS轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒

節(jié)桿菌巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白5抗體Human GIPC1 ELISA Kit小鼠α甘露糖苷(α Manase)免疫試劑盒

擬諾卡氏菌屬菌種Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%,BCβ淀粉樣蛋白1-42試劑盒日蟾它靈

熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRβ淀粉樣蛋白1-40試劑盒七葉皂苷IIb

球毛殼Chaetomium│globosum 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BCβ半乳糖苷試劑盒七葉皂苷IIa
紅色標(biāo)本保色液Ⅰ大腸埃希氏 1-氟-3-基苯8異前列腺Elisa

釀酒酵母 1-戊基-3-氟苯8-異前列腺F2αElisa

擬青霉 4-乙基溴骨I型膠原交聯(lián)C端頂端肽Elisa

葡萄座腔屬 鄰氨基-N,N-二甲酰Ⅰ型膠原N末端肽Elisa

黑附球 5-氨基-2-甲酸Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Elisa

側(cè)孢短芽孢桿 3--5-甲氧基Ⅱ型肺泡表面抗原Elisa

總狀共頭霉 2-基Ⅱ型膠原Elisa

Lysinibacillus 3,6-二氟鄰苯二甲酸酐Ⅱ型膠原C端肽Elisa

硬結(jié)桿 4-羥基-四氟Ⅱ型膠原抗體Elisa

異常威克漢姆酵母 2-氨基-5-Ⅲ型膠原Elisa

空腸彎曲桿 2-溴-5-氟-3-硝基吡啶Ⅲ型前膠原氨基端肽Elisa

高山被孢霉 5-氨甲基-1,3,4-惡二唑-2-甲酸乙酯鹽酸鹽Ⅳ型膠原Elisa

紫色紅曲 3,4,5,6-四氟鄰苯二甲酸Agouti相關(guān)蛋白Elisa

pLVX Tre3G 三乙酸鹽AKT蛋白Elisa

釀酒酵母 3-溴甲酸AMPA離子能谷氨酸受體1Elisa