磷酸二酯酶PDE4抑制劑(Rolipram)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-EGFR(Tyr1086) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MOG /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesu

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

宇佐美曲霉染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體Human GDF5(Growth/differentiation factor 5) ELISA Kit淋巴β(LTB)ELISA Kit

有柄樹(shù)舌靈芝(白芝)單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體Human HSPG2(Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein) ELISA Kit淋巴α(LTA)ELISA Kit

異常漢遜酵母線粒體核糖體蛋白L11抗體Human TEP1(omerase protein component 1) ELISA Kit亮腦啡肽(LEK)ELISA Kit

葡萄座腔菌促血管平滑肌分化因子抗體Human CSTA(Cystatin-A) ELISA Kit亮酰-半胱酰肽(LNPEP)ELISA Kit

枯草芽孢桿菌跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體Human HBA1(Hemoglobin subunit alpha) ELISA Kit亮?；?LAP)ELISA Kit

鳥(niǎo)乳桿菌不解棉子糖亞種磷化致癌基因C-Myc抗體Human SULF2(Extracellular sulfatase Sulf-2) ELISA Kit亮富含重復(fù)絲/蘇蛋白激2(LRRK2)ELISA Kit

膠紅酵母肌收縮蛋白MYOT抗體Human STEAP1(Metalloreductase STEAP1) ELISA Kit亮基肽3(LAP3)ELISA Kit

簡(jiǎn)單芽孢桿菌磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human HIF1AN(Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor) ELISA Kit鏈激(SK)ELISA Kit

pQE70環(huán)指蛋白59抗體Human NAA20(N-alpha-acetyltransferase 20) ELISA Kit連蛋白(zonulin)ELISA Kit

橙色單胞菌磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human DPP10(Inactive dipeptidyl peptidase 10) ELISA Kit粒特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA Kit

大腸埃希菌甲羥戊激抗體Human SOX9(Transcription factor SOX-9) ELISA Kit粒趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA Kit

糞腸球菌甲羥戊脫羧抗體Human AMD1(S-adenosylmethionine decarboxylase proenzyme) ELISA Kit粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA Kit

路德類(lèi)酵母胞漿蘋(píng)果1抗體Human SLC25A5(ADP/ATP translocase 2) ELISA Kit粒巨噬集落激因子(GM-CSF)ELISA Kit

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體Human NOTCH1(Neurogenic locus notch homolog protein 1) ELISA Kit粒集落激因子(G-CSF)ELISA Kit

地衣芽孢桿菌微絲相關(guān)蛋白3樣抗體Human MIOX(Inositol oxygenase) ELISA Kit利什曼原蟲(chóng)抗體(Leishimaria Ab)ELISA Kit

核盤(pán)菌微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Human VDR(Vitamin D3 receptor) ELISA Kit利鈉肽(ANP)ELISA Kit

: ATCC53432資源名稱(chēng): 運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品芍藥苷

惡臭假單胞菌Pseudomonas│putida 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR蕓香柚皮苷

: 399資源名稱(chēng): 黃麻鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)飛薊賓
磷酸二酯酶PDE4抑制劑(Rolipram)ATEXPA10  植物延長(zhǎng)蛋白（擬南芥）鐿粉 99.9%

Ezrin/Radixin  埃茲蛋白抗體茜紅 AR，≥80.0%(HPLC)

Phospho-Ezrin (Tyr353)  化埃茲蛋白抗體茜黃GG IND

Phospho-Ezrin (Thr567)  化埃茲蛋白抗體茜黃R AR

F1 operon positive regulatory protein(NT)  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端）藍(lán)6B IND

F1 operon positive regulatory protein(CT)  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）天青I Biological stain

intestinal FABP/IFABP  腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體天青I 94%

FABP(brain) CT  腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體(C端)天青Ⅱ Biological stain