詳細介紹
商品介紹:
注意事項: 由、酒精、硼酸等組成。在制作保色浸制標本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴實,并避免陽光直射。 儲存條件:室溫,12個月 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細長賴芽胞桿菌巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白4抗體Human GINS3 ELISA Kit小鼠αN已?;咸擒?αNAG)免疫試劑盒
葡萄座腔菌巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白7抗體Human GIPC2 ELISA Kit小鼠αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒
白僵菌巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白9抗體Human GIT2 ELISA Kit小鼠αL艾杜糖苷(IDUA)免疫試劑盒
淡紫擬青霉巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白10抗體Human GIPC1 ELISA Kit小鼠α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒
釀酒酵母癌相關(guān)基因2抗體(鋅指蛋白364)Human GIPC2 ELISA Kit小鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒
桔橙鏈霉菌B淋巴酪激抗體Human GIT2 ELISA Kit小鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒
聚生殼菌腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體Human GJB3 ELISA Kit小鼠α1抗胰糜蛋白(AACT)免疫試劑盒
Maribius pelagius促凋亡BNIP3L蛋白抗體Human GK3P ELISA Kit小鼠α1干擾(IFN-α1)免疫試劑盒
費氏桿菌費氏亞種Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體Human GJB6 ELISA Kit小鼠Wnt-3a蛋白(WNT3A)免疫試劑盒
小孢毛霉BCL2樣10促凋亡蛋白抗體Human GIYD2 ELISA Kit小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)免疫試劑盒
黃微綠鏈霉菌BCL2樣12含脯蛋白抗體Human GFPT2 ELISA Kit小鼠V-Ha-Ras肉瘤病癌基因同源物(HRAS)免疫試劑盒
黑曲霉BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體Human Giantin ELISA Kit小鼠T活化連接蛋白(LAT)免疫試劑盒
谷棒桿菌Ⅰ型轉(zhuǎn)錄因子BTF3抗體Human GJC2 ELISA Kit小鼠T表面糖蛋白CD3 epsilon鏈(CD3E/T3E)免疫試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌Bcl2相互作用蛋白2抗體Human GFRA2 ELISA Kit小鼠T白血病同源盒蛋白1(Tlx1/Hox11/Tlx-1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌癌擴增序列蛋白4抗體Human GFRA3 ELISA Kit小鼠Toll樣受體7(TLR7)免疫試劑盒
大腸埃希菌磷化T淋巴受體抗體Human GIMAP5 ELISA Kit小鼠Toll樣受體5(TLR-5)免疫試劑盒
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRβ基己糖苷A試劑盒去基雛葉龍膽
茄絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRβ4整合試劑盒羥基異亮
: ATCC29358資源名稱: 有害片球菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRβ2轉(zhuǎn)鐵蛋白試劑盒去氫松香
紅色標本保色液Ⅱ紅須腹 尼可地爾apelin 12Elisa
釀酒酵母 雙(3,5-二叔丁基-4-羥基芐基膦酸單乙酯)鈣apelin 13Elisa
糙皮側(cè)耳 3-氨基-4-酚apelin 36Elisa
棘孢木霉 2-甲基-6-三氟甲基-4-羥基嘧啶AP核酸內(nèi)切-1Elisa
兔出血癥病 2-溴-3,5-二氟ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1Elisa
蟬花 2-氟苯基酮ATPElisa
釀酒酵母 3--4-氟苯甲酰Bcl-2相關(guān)X蛋白Elisa
普羅威登斯 (S)-丁酸縮水甘油酯BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白Elisa
木糖葡糖酸醋桿 3-氨基-4-B活化因子Elisa
產(chǎn)氣列契瓦尼爾氏 3,5-二溴-4-甲氧基吡啶-N-氧化物B瘤因子2Elisa
科貝特氏屬 2-(2-氨基噻唑-4-基)乙酸乙酯Ca-ATPElisa
大腸埃希 3-氨基-4-溴CAAT區(qū);增強子結(jié)合蛋白αElisa
舌螺狀 4-羥基-3-喹啉CAAT區(qū);增強子結(jié)合蛋白βElisa
蠟狀芽孢桿 6,9-二氟-11,17-二羥基-16-甲基-3-氧代雄甾-1,4-二烯-17-羧酸cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白Elisa
勞地毛霉 咪唑并[1,2-a]吡啶-2-羧酸CC趨化因子受體5Elisa