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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-21 11:37:57瀏覽次數(shù)：207
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500T|1000T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X9603 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | Cell Viability Detection Kit |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Cell Viability Detection Kit | 500T|1000T | 1～3天 |
商品介紹：
我司細胞活力檢測試劑盒提供了一種可靠、靈敏、安全和低成本的快速有效檢測細胞活力與毒性的方法。本產(chǎn)品利用靈敏的易被氧化還原的物質(zhì)通過在細胞生長的培養(yǎng)基中所產(chǎn)生的化學還原反應，將非熒光信號的染料轉(zhuǎn)換成為紅色熒光物質(zhì)，從而檢測細胞的存活率。該熒光信號可以用530nm 的激發(fā)波激發(fā)，在590nm 處可以獲發(fā)射波。檢測所產(chǎn)生的熒光信號是與樣品中的活細胞數(shù)成正比的。根據(jù)不同類型的細胞，本試劑盒可以檢測到至少40 個細胞/孔，同時保證很好的重現(xiàn)性和靈敏度。 操作說明 以下操作可用作通用指導建議?？紤]不同細胞類型與培養(yǎng)條件的差異性，有必要根據(jù)實際情況優(yōu)化您的操作步驟。 1.96 孔細胞培養(yǎng)板每孔100μL 培養(yǎng)基飼養(yǎng)細胞，控制細胞數(shù)目在40~10000 個/貼壁細胞，2000~500000 個/懸浮細胞。設置空培養(yǎng)基做對照。 2.加入10μL 檢測液至培養(yǎng)基中，37 度避光孵育5-6 小時。 3.熒光微孔板讀數(shù)530nm 激發(fā)，590nm 發(fā)射波讀數(shù)。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員2(TRPV2)英文名稱：TRPV2 ELISA Kit紅2,3 - 二磷甘油合成抗體包裝1g
轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員1(TRPV1)英文名稱：TRPV1 ELISA Kit布氏桿菌菌體蛋白抗體包裝5g
轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(TRPM4)英文名稱：TRPM4 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝100ml
轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白(TGFβI)英文名稱：TGFβI ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝500ml
轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅱ(TGFβR2)英文名稱：TGFβR2 ELISA Kit多聚合苷激3磷化抗體包裝25ml
轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅰ(TGFβR1)英文名稱：TGFβR1 ELISA Kit癌易感基因1抗體包裝1ml
轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)英文名稱：TGFβ3 ELISA KitBcl-2同源拮抗劑抗體包裝5ml
轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)英文名稱：TGFβ1 ELISA Kitβ3腎上腺能受體抗體包裝1g
主要堿性蛋白(MBP)英文名稱：MBP ELISA Kit腦鈉/利鈉肽抗體包裝5g
軸突生長誘向因子1(Ntn1)英文名稱：Ntn1 ELISA KitBZW2蛋白抗體包裝1g
周期依賴性激抑制因子2A(CDKN2A)英文名稱：CDKN2A ELISA Kit緩激肽B1受體抗體包裝1g
周期依賴性激抑制因子1A(CDKN1A)英文名稱：CDKN1A ELISA Kit鈣激活通道蛋白α1抗體包裝250mg
周期依賴性激8(CDK8)英文名稱：CDK8 ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白2抗體包裝5g
重肽鐵蛋白(FTH)英文名稱：FTH ELISA Kit絲/蘇蛋白激SAD-B抗體包裝1g
腫廇蛋白P63(TP63)英文名稱：TP63 ELISA Kit鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝25g
去整合樣金屬蛋白19抗體肌肉生長抑制(MSTN)FRAX597 is a potent, ATP-competitive inhibitor of group I PAKs with IC50 of 8 nM
細胞活力檢測試劑盒(96孔熒光計)嗜根考克氏 四丁基二氟三苯硅酸銨熱休克70kDa蛋白12B檢測試劑盒
大豆慢生根瘤 2-乙基己基磷酸單-2-乙基己酯熱休克蛋白10檢測試劑盒
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香蕉 2,4-二甲基芐溶酶體相關(guān)膜蛋白2檢測試劑盒
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