商品介紹:
用途: 含有福爾馬林、乙酸、乙醇等。 注意事項(xiàng): 推薦用于海水藻類的保存。此類保存液不能保色,如需保色,需用此保存液作用1-2天后轉(zhuǎn)入保色液中長(zhǎng)期保存。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
海水藻保存液Ⅰ |
| 100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
蘇云金芽胞桿菌激活受體1C抗體Human HYDIN ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌整合樣金屬蛋白與凝血13型抗體Human IFFO1 ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒
果生鏈核盤(pán)菌去整合樣金屬蛋白11抗體Human IFIT1L ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒
Nitriliruptor去整合樣金屬蛋白12抗體Human IAH1 ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒
葡萄座腔菌去整合樣金屬蛋白15抗體Human IARS2 ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)免疫試劑盒
馬賽菌去整合樣金屬蛋白2抗體Human IFIT2 ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒
谷棒桿菌載脂蛋白E2受體抗體Human ICAM2(Intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
短波單胞菌腺苷A1受體抗體Human ICA1L ELISA Kit小鼠巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒
草菇水通道蛋白0抗體Human ICK ELISA Kit小鼠巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒
釀酒酵母轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體Human IDH3G ELISA Kit小鼠金屬硫蛋白2(MT-2)免疫試劑盒
土曲霉血管生成相關(guān)蛋白5Human IDO2 ELISA Kit小鼠金屬硫蛋白1(MT-1)免疫試劑盒
膠孢錨蛋白重復(fù)域53抗體Human IDI2 ELISA Kit小鼠解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病錨蛋白重復(fù)域54抗體Human IDNK ELISA Kit小鼠解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)免疫試劑盒
根霉屬的菌ATP合成β5抗體Human HSPA1L ELISA Kit小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)免疫試劑盒
猴頭菌肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白3抗體Human HUS1B ELISA Kit小鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)免疫試劑盒
色褐鏈霉菌腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體Human HSPA13 ELISA Kit小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)免疫試劑盒
柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,BR白介17B試劑盒合氧化前胡
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC白介17A試劑盒松柏
W-50=CIP107174=DSM14551資源名稱: 威特弗拉里亞鞘盒菌 質(zhì)量規(guī)格:比活性:>200 U/mg,BC白介16試劑盒仙環(huán)
海水藻保存液Ⅰ密叢毛霉 α,α-二乙酸酯脂肪甘油三酯脂Elisa
膠孢 1-芐基海因胱天蛋白1Elisa
籬邊粘褶 七氟異基活化受體樣激1Elisa
叢毛紅曲 4-乙氧基苯乙肝Elisa
墻支頂孢 2,5-二煙酸甲酯脫2Elisa
酵母 吲唑-4-羧酸脂肪酸酰水解1Elisa
食酸屬 7-羧基-1H-吲唑單酰基甘油酯Elisa
假委內(nèi)瑞拉鏈霉 基氧膦N-乙酰天門(mén)冬氨酸Elisa
釀酒酵母 1-芐基-4-甲角蛋白18Elisa
薄層桿 3-基-4-氟甲酯氫ATPElisa
弗吉尼亞鏈霉 2,3,5-三氟苯甲煙酰Elisa
Microbacterium halotolerans 6--咪唑并[1,2-b]吡-3-甲乙酸酯趨化Elisa
芽孢桿屬 1-甲基-5-硝基-1H-甲殼質(zhì)蛋白40Elisa
白僵 4-丁縮二甲半胱氨酸蛋白11Elisa
奇異球 環(huán)丁半胱氨酸蛋白1βElisa