商品介紹:
PCNA 是細胞DNA 多聚酶的“δ"輔助蛋白,是真核細胞DNA 合成時所必需的一種酸性核蛋白。 PCNA 在細胞核內(nèi)合成,并儲存在核內(nèi),細胞處于靜止狀態(tài)時,其含量很低,當細胞進入增殖周期中,其表達明顯增加,故PCNA 的表達高低可反映細胞增殖的活躍程度。在活檢或手術(shù)切除的組織切片或細胞涂片上,用免疫技術(shù)檢測到PCNA 表達增高有助于腫瘤組織的診斷。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PCNA細胞增殖檢測試劑盒(IHC法) | PCNA cell proliferation Detection Kit(IHC) | 50T | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
脂1(LPIN1)英文名稱:LPIN1 ELISA KitBRPF3蛋白抗體包裝5g
脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)英文名稱:ADIPOR1 ELISA KitBXDC1蛋白抗體包裝25g
脂解激活脂蛋白受體(LSR)英文名稱:LSR ELISA Kit腦蛋白44抗體包裝5g
脂肪細胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)英文名稱:FABP4 ELISA Kit腦蛋白44樣蛋白抗體包裝250mg
脂肪合(FASN)英文名稱:FASN ELISA Kit嗜乳脂蛋白樣2抗體包裝1g
脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)英文名稱:LBP ELISA Kit嗜乳脂蛋白樣8抗體包裝5g
脂多糖(LPS)英文名稱:LPS ELISA Kit嗜乳脂蛋白樣9抗體包裝10MG
脂蛋白脂(LIPD)英文名稱:LIPD ELISA KitBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝1g
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂A2(LpPLA2)英文名稱:LpPLA2 ELISA Kit腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體包裝25g
脂蛋白a(Lpa)英文名稱:Lpa ELISA KitBcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝5g
整合β3(ITGβ3)英文名稱:ITGβ3 ELISA Kit腦環(huán)核苷門控通道蛋白1抗體包裝25g
整合αM(ITGαM)英文名稱:ITGαM ELISA Kit癌易感基因復合蛋白4抗體包裝5g
整合α3(ITGα3)英文名稱:ITGα3 ELISA Kit紡錘體檢查點蛋白抗體包裝1g
整合α1(ITGα1)英文名稱:ITGα1 ELISA Kit有絲分裂檢驗點蛋白BubR1抗體包裝5g
真核翻譯起始因子2α激3(EIF2αK3)英文名稱:EIF2αK3 ELISA Kit癌相關(guān)蛋白3抗體包裝5mg
整合樣金屬蛋白與凝血樣1蛋白抗體肌肉生長抑制(MSTN)BMS-911543 是一種選擇性的 JAK2 抑制劑,IC50 值為 1.1 nM,對 JAK1,JAK3 和 TYK2 的選擇性相對較弱,IC50 值分別為
PCNA細胞增殖檢測試劑盒(IHC法)灰黃淺黃酵母 (S)-4-N-叔丁氧羰基-2-甲基哌軟骨糖蛋白39檢測試劑盒
釀酒酵母 乙叉降冰生烯潤滑素檢測試劑盒
水稻黃單胞(水稻白葉枯)* 2'-F-dU亞磷酰單體狀腺原氨酸檢測試劑盒
金霉素鏈霉 吡唑-3-羧酸氧芐氨嘧啶檢測試劑盒
巨獸芽孢桿 2-氟腺苷三磷酸磷脂酰肌檢測試劑盒
三葉草根瘤 1-BOC-3-甲磺?;跫谆姿嵯佘諜z測試劑盒
香菇 5-氯-2,4-二氟苯三葉因子3檢測試劑盒
大麗輪枝霉 2-氟-4-甲氧基苯酸色氨酰tRNA合成酶檢測試劑盒
長根小奧德蘑 2--3-甲酸甲酯色素上皮衍生因子檢測試劑盒
里拉微球 2-基-4-甲基吡啶性;通透性增加蛋白檢測試劑盒
釀酒酵母 2,6-二甲基-4-氟甲酯殺傷球蛋白樣受體檢測試劑盒
擬莖點霉 7-氟-6-硝基-4-羥基喹唑啉沙眼衣原體主要外膜蛋白檢測試劑盒
長鹽土生古 2-乙基-2-金剛烷山梨脫氫酶檢測試劑盒
大腸埃希氏 2-基丁酸乙酯上皮膜蛋白2檢測試劑盒
蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 叔丁基亞磺酰上皮膜抗原檢測試劑盒