詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:Ki67細胞增殖檢測試劑盒(IHC法)
英文名稱:Ki-67 cell proliferation Detection Kit(IHC)
產品規(guī)格:50T
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Ki-67 蛋白是細胞周期相關的一種核蛋白,主要表達于細胞增殖分裂的各個時期(G1、S、G2 和M 期),但是在靜息的細胞(G0 期)中不表達。 Ki-67 常用于檢測腫瘤細胞的生長指數(shù)(免疫組化法利用計算細胞總數(shù)中的Ki-67 陽性細胞數(shù)所占比例得到Ki-67 指數(shù))。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
著絲粒蛋白H(CENPH)英文名稱:CENPH ELISA Kit癌相關蛋白2抗體包裝100g
粘蛋白5B(MUC5B)英文名稱:MUC5B ELISA Kit癌抗雌激耐藥蛋白1包裝25g
粘蛋白5AC(MUC5AC)英文名稱:MUC5AC ELISA Kit胞漿支鏈基轉抗體包裝500g
粘蛋白4(MUC4)英文名稱:MUC4 ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝1g
粘蛋白2(MUC2)英文名稱:MUC2 ELISA Kit促凋亡調節(jié)蛋白BNIP3抗體包裝250mg
粘蛋白1(MUC1)英文名稱:MUC1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體包裝5g
早期生長應答因子4(EGR4)英文名稱:EGR4 ELISA Kit狀腺激受體共激活蛋白抗體包裝1g
早期生長應答因子2(EGR2)英文名稱:EGR2 ELISA Kit磷化促凋亡Bik蛋白抗體包裝100mg
早期生長應答因子1(EGR1)英文名稱:EGR1 ELISA Kit蛋白酪激BAP135抗體包裝1g
再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)英文名稱:REG3γ ELISA Kit磷化相關死亡促進因子抗體包裝5g
再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)英文名稱:REG3α ELISA Kit磷化Bax抗體包裝1g
再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)英文名稱:REG1β ELISA KitBcl-10抗體包裝25g
載脂蛋白H(APOH)英文名稱:APOH ELISA Kit原癌基因Bcl-6抗體包裝5g
載脂蛋白F(APOF)英文名稱:APOF ELISA Kit磷化Bcl-10抗體包裝100g
載脂蛋白E(APOE)英文名稱:APOE ELISA Kit磷化死亡調解子抗體包裝25g
整合樣金屬蛋白與凝血樣2蛋白抗體肌肉生長抑制(MSTN)PRT-060318 (PRT318)是新穎選擇性的酪激 (Syk) 抑制劑, IC50值為4 nM。
Ki67細胞增殖檢測試劑盒(IHC法)蟹枝毛殼 5,6,7,8-四氫-8-羥基喹啉上皮黏附分子檢測試劑盒
矮小傘枝霉 4-氯-3-酸神經氨酸酶檢測試劑盒
蘇云金芽胞桿多窩亞種 5-甲基尿甙神經膠質纖維酸性蛋白檢測試劑盒
陰溝腸桿 4'-溴-2,2,2-三氟苯乙酮神經節(jié)苷脂M3抗體檢測試劑盒
埋藏曲霉 1-乙基環(huán)戊神經生長導向因子檢測試劑盒
異常漢遜酵母 (3AR,7AS)-REL-八氫-1H-異鹽酸鹽神經生長因子檢測試劑盒
泛酸枝芽孢桿 3--2-羧酸神經絲蛋白檢測試劑盒
野蘑菇 二甲硫烷神經損傷誘導蛋白1檢測試劑盒
多根硬皮馬勃 月桂酸鋰神經肽A檢測試劑盒
相思根瘤 埃索美拉唑鈉神經肽B檢測試劑盒
乳桿屬 4,4-二甲氧基丁神經肽Y檢測試劑盒
枯草芽胞桿 2,3,4-三氟苯甲神經調節(jié)蛋白1檢測試劑盒
豬輪狀病 3-(三氟乙酰基)神經粘附分子1檢測試劑盒
谷氨酸棒桿 1-N-Cbz-4-基神經酰檢測試劑盒
釀酒酵母 甲磺酸己酯神經型一氧化氮合成酶檢測試劑盒