線粒體谷氨酰胺轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑(L-Hisidine)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-DAPK3/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Ly-6G/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞抗原6G抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh CAP57 中性粒細(xì)胞殺菌蛋

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

釀酒酵母單跨膜蛋白FOXRED1抗體Human AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KIT綿羊彈性蛋白2,中性粒(ELA2)免疫試劑盒

淺紫灰鏈霉菌淺紫灰亞種FOXRED2蛋白抗體Human AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KIT綿羊催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒

釀酒酵母巖藻糖1磷鳥苷酰轉(zhuǎn)移抗體Human ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊雌二(E2)免疫試劑盒

雷斯青霉外基質(zhì)蛋白FREM1抗體Human ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KIT綿羊成纖維生長(zhǎng)因子23(FGF23)免疫試劑盒

芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)原癌基因FRAT1抗體Human ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)免疫試劑盒

黑曲霉叉頭蛋白D1抗體Human AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KIT綿羊補(bǔ)體片段3a(C3a)免疫試劑盒

長(zhǎng)柔毛栓孔菌11重鏈抗體Human AMBN (Ameloblastin) ELISA KIT綿羊白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒

謝瓦曲霉12輕鏈抗體Human APCDD1 (Protein APCDD1) ELISA KIT綿羊白介6(IL-6)免疫試劑盒

表皮葡萄球菌FLAG Tag標(biāo)簽抗體（C端）Human ADRB1 (Beta-1 adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊白介4(IL-4)免疫試劑盒

苛求芽胞桿菌補(bǔ)體因子I重鏈抗體Human SPAG9(C-Jun-amino-terminal kinase-interacting protein 4) ELISA Kit綿羊白介2受體(IL-2R)免疫試劑盒

煙管菌8/第八/第八因子相關(guān)抗原輕鏈抗體Human ADAR (Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) ELISA KIT綿羊白介2(IL-2)免疫試劑盒

節(jié)桿菌磷化叉頭蛋白4抗體Human STC2(Stanniocalcin-2) ELISA Kit綿羊白介1β(IL-1β)免疫試劑盒

青霉磷化叉頭蛋白4抗體Human ADCY9 (Adenylate cyclase type 9) ELISA KIT綿羊白介1α(IL-1α)免疫試劑盒

普利茅斯沙雷氏菌甲基肽受體1抗體Human AHCYL1 (Adenosylhomocysteinase 2) ELISA KIT綿羊白介13(IL-13)免疫試劑盒

甲型副門氏菌磷化粘著斑激抗體Human ADSL(Adenylosuccinate lyase) ELISA Kit綿羊白介12(IL-12)免疫試劑盒

窄食單胞菌FUT5抗體Human AHCYL2 (Adenosylhomocysteinase 3) ELISA KIT綿羊白介10(IL-10)免疫試劑盒

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)醋辛酯

鹽海桿狀菌Marinobacter│salsuginis 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)蟲草

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)補(bǔ)骨脂二氫黃
線粒體谷氨酰胺轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑(L-Hisidine)維A;(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Catharanthine sulfate多巴受體D2抗體包裝5g

維E煙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Catharanthine sulfate多巴受體D1抗體包裝100ml

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Combretastatin A4 多巴受體相互作用蛋白1抗體包裝25ml

維生A醋酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Oxytetracycline凋亡相關(guān)蛋白激1抗體包裝5ml

維生B1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Oxytetracycline凋亡相關(guān)蛋白激2抗體包裝1g

維生B12(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Chrysin多巴、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體包裝500mg

維生B3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Chrysin磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體包裝100g

維生B6（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Formononetin磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體包裝25g

維生C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Formononetin磷化雙皮質(zhì)抗體包裝25g

維生C鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Daidzein磷化Disabled 1抗體包裝5g

維生K3,萘醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Daidzein磷化Disabled 1抗體包裝1g

萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： D(-)-allo-Threonine磷化Disabled 1抗體包裝5g

肟菌酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Deoxycorticosterone acetate 雙皮質(zhì)抗體包裝25g

烏拉地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Deoxycorticosterone acetate D酪激衰減蛋白2抗體包裝5g

烏拉地爾雜質(zhì)A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tetrahydro-L-Biopterin (dihydrochloride)磷化D酪激衰減蛋白2抗體包裝25g