ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點多，更加方便我們的科研學(xué)者進行科學(xué)實驗，是科研實驗的好伙伴。

實驗流程:
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
注意事項：
1.加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。

LB肉湯顆粒 250g 用于分子生物中大腸桿菌的培養(yǎng)

顯色培養(yǎng)基系列  

MUG培養(yǎng)基 100g 用于藥品和生物制品中大腸埃希氏菌的檢測

茜素-β-半乳糖苷瓊脂(Aliz-gal瓊脂) 100g 用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測和計數(shù)（GB/T）

大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 1000(ML) 用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時，大腸桿菌顯藍綠色

大腸菌群顯色培養(yǎng)基 1000(ML) 用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸菌群，培養(yǎng)24小時，大腸菌群顯藍綠色

大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基 1000(ML) 用于快速、準(zhǔn)確同時檢測大腸桿菌和大腸菌群，培養(yǎng)24小時，大腸桿菌顯藍綠色-紫色,大腸菌群顯紅色

大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基(平皿) 9CM平皿 用于快速、準(zhǔn)確同時檢測大腸桿菌和大腸菌群，培養(yǎng)24小時，大腸桿菌顯紫色,大腸菌群顯紅色

TBX培養(yǎng)基 1000(ML) 用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸桿菌，培養(yǎng)24小時，大腸桿菌顯藍綠色

細菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基 250g 用于快速、準(zhǔn)確檢測細菌總數(shù)，培養(yǎng)24小時，細菌顯紅色

O157顯色培養(yǎng)基 1000(ML) 用于O157菌的顯色培養(yǎng)，O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基 1000(ML) 用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)沙門氏菌顯亮紅色

李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 1000(ML) 用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng)，單增李斯特氏菌顯藍色，外圍有一不透明環(huán)

金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基 1000(ML) 用于金黃色葡萄球菌的顯色培養(yǎng)，金黃色葡萄球菌顯藍綠色

CEA/CD66癌胚抗原ELISA KitFBXO42  FBXO42蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

PPIA/Cyclophilin A  親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIA抗體 規(guī)格: 0.1ml

HDL  高密度脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

NPR2L/G21 protein  G21蛋白質(zhì)抗體 規(guī)格: 0.2ml

BTNL8  嗜脂蛋白樣8抗體 規(guī)格: 0.2ml

CARD8  凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 規(guī)格: 0.1ml

Bad  相關(guān)死亡促進因子Bad抗體 規(guī)格: 0.1ml

ANKRD33B  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體 規(guī)格: 0.2ml

CTn1/Troponin I/TNNC1  心肌肌鈣蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-human IgG/Bio  生物素標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG  兔抗馬IgG 規(guī)格: 1mgTLK2  絲氨酸/蘇氨酸激酶TLK2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Collagen VIII alpha 1  8型膠原抗體(內(nèi)皮膠原蛋白) 規(guī)格: 0.2mlCLN3  神經(jīng)細胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體 規(guī)格: 0.2ml

IL-6  白介素6抗體 規(guī)格: 0.1mlDACH1  細胞命運決定因子DACH1抗體 規(guī)格: 0.2ml

EF1a  翻譯延伸因子EF-1a抗體 規(guī)格: 0.2mlCDK11  周期素依賴性激酶11抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-TAK1(Thr184)  磷酸化轉(zhuǎn)化生因子β活化激酶1 規(guī)格: 0.1mlVTN/Vitronectin  玻璃粘連蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。