商品介紹:
用途: 含有福爾馬林、乙酸、乙醇等。 注意事項(xiàng): 推薦用于淡水藻類的保存。此類保存液不能保色,如需保色,需用此保存液作用1-2天后轉(zhuǎn)入保色液中長(zhǎng)期保存。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
淡水藻保存液Ⅰ |
| 100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Arthrobacterβ淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體Human HSPB7 ELISA Kit小鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫試劑盒
總狀毛霉錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體Human HSD17B6 ELISA Kit小鼠甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
新月彎孢二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移3抗體Human HSD17B7 ELISA Kit小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒
根瘤菌二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移5抗體Human HSD17B8 ELISA Kit小鼠甲基化(Methylase)免疫試劑盒
俏紅芝腺苷單磷脫1抗體Human HSD3B2 ELISA Kit小鼠己糖激(HK)免疫試劑盒
德沃斯氏菌屬紅蛋白Ank1抗體Human HPS6 ELISA Kit小鼠低密度脂蛋白受體(VLDLR)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌腺苷琥珀裂解抗體Human HPSE2 ELISA Kit小鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌α1B糖蛋白抗體Human HRASLS5 ELISA Kit小鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒
菜豆間座殼載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體Human HOXD4 ELISA Kit小鼠基質(zhì)衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)免疫試劑盒
油脂酵母凋亡誘導(dǎo)因子3抗體Human HRC ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)免疫試劑盒
平菇凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體Human HRH2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒
米曲霉凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體Human HP1BP3 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒
瓶形毛殼性神經(jīng)鞘磷脂抗體Human HOXD8 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
加米那類芽孢桿菌腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human HRP 2(Hepatoma-derived growth factor-related protein 2) ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒
南鼠尾桿菌肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體Human HRPT2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)免疫試劑盒
間型彎孢ATPH+轉(zhuǎn)運(yùn)溶體輔助蛋白2抗體Human HSDL2 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒
腐皮鐮孢Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR白介-12受體試劑盒石蒜裂堿
豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)白介12試劑盒四氫非洲防己堿
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:AR白介12試劑盒石松靈堿
淡水藻保存液Ⅰ糞腸球* 2-氨基苯乙集落激因子1Elisa
日本色鹽桿 4-甲酸甲酯高密度脂蛋白2Elisa
解鳥(niǎo)氨酸克雷伯 6--咪唑并[1,2-b]吡-3-甲高密度脂蛋白3Elisa
綠色鏈霉 3-氨基-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶Trim22分子Elisa
多粘類芽孢桿 5-溴煙酸甲酯NADPH氧化4Elisa
枯草芽孢桿 2-氮己環(huán)酮G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1Elisa
叢毛紅曲 3,5-二甲基吡唑溶血磷脂酰?;D(zhuǎn)移1Elisa
腐質(zhì)霉 4-氟-3-三氟甲基芐酰基氧化Elisa
傘枝犁頭霉 3-(3-嗎啉氧基)-4-甲氧基芐NADPH氧化4Elisa
迪吉氏黃桿 3-噻吩-2-甲還原型輔ⅠElisa
木賊鐮刀 ZONYL(R) FSP煙酰腺嘌呤二核苷酸Elisa
Sphingobium fuliginis 5-氟-2-甲氧基苯磺酰外基質(zhì)蛋白1Elisa
土曲霉 2,4,6-三羥苯乙酮偽狂犬病Elisa
鶴羽田戴爾福特 4-甲氧基水楊酰脈絡(luò)叢腦膜炎病Elisa
無(wú)色殼囊孢 5-溴-2--3-硝基吡啶一氧化氮合成1Elisa